根据流行病学、临床症状、尸体剖检和应用各种抗菌药物无明显疗效，可初步诊断为鸡传染性支气管炎，但必须对IBV进行分离鉴定才能作出最终诊断。实践证明，以下方案是切实可行的。收集气管、肺、肾等病变材料制成悬液，接种于经抗菌处理后的9 ~ 10日龄鸡胚尿囊腔内，每隔48小时在4冷冻胚胎，获得尿囊液。选取NDV凝集反应阴性的尿囊液进行3 ~ 5代，观察典型的矮小胚胎变化，并进行鸡胚干扰NDV试验。这个试验很简单：将疑似IBV的尿囊液接种到9-10日龄的鸡胚中，10小时后再接种减毒的NDVB1病毒。再过36小时(总共46小时)后，收集尿囊液以检测其对鸡红细胞的凝集作用(HA ),并比较仅接种NDV-B1株的尿囊液的HA下降价格。如果前一个HA的滴价为20，而后一个HA的滴价为40，则可以认为是干扰，该分离物几乎可以确定为IBV(辛朝安，1982)。有时最初的患病材料被混入NDV。此时可用NDV抗血清进行致敏，然后接种鸡胚纯化IBV(艾国光等，1980，1982)。分离物获得后，应进行人工繁殖。通过喉口向11 ~ 28日龄雏鸡气管内注射0.2ml毒性胚胎液，一般在24 ~ 48小时内出现典型的呼吸道症状。有人跟踪通过鼻子滴入的有色液体，发现它是通过吞咽进入消化道的。因此，认为滴鼻感染鸡的气管刮屑中的病毒是感染后繁殖的病毒，而不是最初滴下的病毒，因此滴鼻后从气管中回收病毒是一个合理的程序。
对IBV的进一步鉴定，除了抗脂溶剂、耐温、耐酸碱、核酸类型鉴定、电镜观察等理化检验外，还常用各种血清学方法。它们也可用于疾病调查，其中值得一提的有以下几种。
1.中和试验将标准阳性血清与被检测病毒混合，接种鸡胚、鸡胚气管器官培养物或CEK细胞培养物等进行中和试验。前两种宿主系统适用于新分离的野生病毒，但CEK系统需要一种适应性病毒株，该病毒株在多次传代后能在CEK产生CPE。中和试验特异性高，能鉴定血清型，取材容易，但需要几天才能出结果。
2.间接血凝试验。用已知的IBV标准品致敏经戊二醛和单宁酸处理过的兔红细胞，制备抗体的抗原。这项测试非常敏感和特异。可检测100%感染鸡，抗体效价可达512倍。感染后60天抗体价格不下降。可与新城疫(ND)、马立克氏病(ND)、传染性喉气管炎(ILT)等鸡传染病的阳性血清相鉴别。将被检病毒注射到鸡体内制备抗血清，进行间接血凝试验，可确定其是否与红细胞上的IBV为同一血清型。该试验操作简单，见效快。有两种操作方法：白瓷板法用未稀释血清在20 ~ 25下2min测定结果；微量板法将血清稀释2倍，室温下2h即可测定(王等，1984)。
3.琼脂凝胶沉淀试验(AGPT)，通常称为琼脂扩散试验，用于IB作为抗体检测(关等，1991)。用于抗原检测时，应使用鸡制备标准IB高免血清；阻力检测的原理是气管刮除。感染后12小时出现阳性结果，第3天和第4天比例较高，持续一周。这种方法是特异的，可以与ILT、nd和FP(黄国模，1984)相区别。有人用巴比妥类缓冲液配制的琼脂平板，在电压4-6 V，电流4-5 mA，时间1.5h的条件下进行对流电泳。发现发病后第二天没有出现降水线，只是出现了
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