猪群监测新方法——唾液检测法


编者按:范付豪博士在流行病学上提出“免疫指数”、“健康指数”、“暴发指数和传播指数”后,又提出唾液检测和血清学方法中抗体检测的匹配度和重合度可以表示通过一个参数。用唾液检测方法监测猪在中国是第一次正式报道,但美国早在2年前就已将其用于检测PRRS病毒,而在人类医学上,唾液已被应用于检测艾滋病。人们习惯的血清学检测对采血技术要求很高,给猪带来了很大的压力。一些养猪场往往只在猪生病时才进行检测。不过,如果唾液检测法适用,还是值得推广的。本文简要介绍唾液检测方法的使用,以供参考。

血清学检测在猪群免疫监测和疾病诊断中具有重要作用。但由于采血技术要求高,必须配备专用的血清分离设备(如离心机等),操作程序复杂。而且,一旦发生溶血或污染,对检测结果影响很大。人们一直期待新的检测方法,唾液法是其中一种比较有前途的方法。

唾液法有很多优点:采集的唾液可以直接冷冻,唾液中的多种酶类(如唾液淀粉酶、碱性蛋白酶)和抗菌物质可以使样本保存更长时间;唾液采集方法简单,因此采集唾液的方法科学,不会对机体造成任何伤害,不会给猪造成应激。此外,唾液中的抗体主要是分泌型抗体,对解读免疫功能具有特殊意义。

唾液采集法:

唾液采集的方法很简单,利用猪好奇、咀嚼的特点,用纱布球采集唾液。将纱布做成纱球,固定在金属丝的前端。猪只会主动咀嚼纱球,唾液会通过虹吸现象进入纱球。将纱球中的唾液挤出,放入样品袋中。将样品袋中的唾液转移到离心管中。

检测方法:

采集的血液必须经过预处理才能检测抗体或病原体。 10x104rpm离心1分钟,去除杂质,保留上清液。按照常规程序进行ELISA 或PCR 检测。

结果判断:

1、如果唾液中的病原体检测呈阳性,说明身体正在排毒。

2.由于唾液中的抗体和血液中的抗体不是同一个概念,所以要避免用对血清抗体的理解来解释唾液中抗体的作用。血清中的抗体大部分是循环抗体,部分循环抗体抗病活性低,只能与抗原机械结合。分泌型抗体的产生率是血清循环抗体的两倍。除了机械结合外,分泌型抗体还具有主动捕获抗原、激活补体的经典和互补途径、ADCC 和凝集作用。

为了便于理解抗体在唾液中的作用,可以使用相对抗体(相对抗体量)的概念。

相关抗体:

指同一方法检测抗体量的相对大小,常指同一实验室、同一类型试剂盒、同一类型样本所获得结果的相对大小(以百分比表示)。相关抗体的校正参数必须基于大量的试验数据。这些数据必须包括完全负值、低抗体滴度值、中等抗体滴度值和高抗体滴度值。样本量最好大。标准偏差应至少为30。

相对抗体的概念解决了不同实验室、不同试剂盒、不同类型样本(如血液、唾液)之间测量值的可比性问题。值大小的影响。绝对量的抗体不具有这样的特性。

重要说明:

唾液中出现分泌性抗体表明身体最近被病原体感染或最近用弱毒疫苗免疫;分泌性抗体的出现也表明机体对某种病原体具有实质性的抵抗力。

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