蛇毒 酶学性质


从蛇毒中分离出的L-氨基酸氧化酶水解L-亮氨酸的最适pH为7.5,但不同底物的最适pH不同。在pH 7.5 时,酶不能氧化赖氨酸和鸟氨酸,在pH9.4 时底物容易被氧化。 L-氨基酸氧化酶对各种氨基酸的反应速度不同。一般来说,氨基酸链越长,对酶越敏感。除碳原子外,对其他原子的构型无要求,如L-异亮氨酸和异亮氨酸对酶敏感。从蛇毒中分离出的L-氨基酸氧化酶,其最

合适的氨基酸是亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸和甲硫氨酸。其酶活性受苯甲酸、水杨酸、偏磷酸和碘乙酸的强烈抑制。由于蛇毒中L-氨基酸氧化酶含量高,提取方便,本实验室广泛用于生产各种纯酮酸,也可用于3,5-二碘酪氨酸生产甲状腺素和用于氨基酸光学异构体的鉴定。

泽勒等人。 (1965) 测量了从C1 中分离出的L-氨基酸氧化酶的Km 值。蛇毒

测定:以L-亮氨酸为底物Km为14.3mmol/L;以苯丙氨酸为底物,Km为1.8mmol/L;以色氨酸为底物,Km为3.8mmol/L。加入20 毫摩尔/LD-苯丙氨酸不会影响对L-苯丙氨酸的更快反应速度。蛇毒中的L-氨基酸氧化酶作用于许多含硫氨基酸,但其亚砜衍生物、S-腺苷-L-甲硫氨酸、磺基丙氨酸、高磺基丙氨酸、羊毛硫氨酸和胱硫醚无作用。在pH7.5时,对下列底物的亲和力顺序为:L-甲硫氨酸(Km=0.35mmol/L)、L-高半胱氨酸(0.72mmol/L)、L-高半胱氨酸(1.3mmol/L)、S-腺苷-L-高半胱氨酸(1.9mmol/L)、S-核苷-L-高半胱氨酸(2.2mmol/L)、L-甲基半胱氨酸氨基酸(3.1mmol/L)、半胱氨酸(4.5mmol/L) ) 和L-胱氨酸(5.0 毫摩尔/升)。高浓度底物可抑制L-氨基酸氧化酶的活性,抑制程度与氧气压力有关。常压下pH7.5时,L-亮氨酸高于5Xl(T3m0l/L时可抑制该酶活性,同等条件下缬氨酸在0.3mol/L时不能抑制其活性。

国内学者对L-氨基酸氧化酶的研究并不多,有关该酶的报道也很少。云南省昆明动物研究所第四实验室对湖南产眼镜蛇毒进行柱层析分离及有毒成分分析

测定酶活,发现峰3、峰4和峰5具有L-氨基酸氧化酶活性。张宏基(1980)分离出尖吻鳐的毒液,也发现粗毒液中含有L-氨基酸氧化酶活性。

Zeller(1948,1951)报道蛇毒L-氨基酸氧化酶可以激活组织中的肽酶和蛋白水解酶,但有人对这一结果持怀疑态度。研究了L-氨基酸氧化酶的生理作用,证明从V.am-蛇毒中分离出的L-氨基酸氧化酶不能激活人血清亮氨酸氨肽酶。他还发现兔子的动脉血压不受酶作用的影响,但会引起组织坏死。从金刚毒蛇毒中分离出的L-氨基酸氧化酶对小白鼠的半数致死剂量为9.13mg/kg,几乎达到原毒毒毒性的50%,但由于该酶在原毒毒中的含量为只有1%,所以L-氨基酸氧化酶对毒性的影响还是比较小的。 Russell 发现这种酶不影响神经、肌肉和神经肌肉的传递。杨等。 (1959)发现眼镜蛇舟山亚种(W.mafra)中的L-氨基酸氧化酶与神经毒性无关,因此认为该酶对毒性影响不大。总的来说,蛇毒L-氨基酸氧化酶的生理作用尚不明确,有待进一步研究。

对蛇毒中的乳酸脱氢酶知之甚少。它首先由Mclean 等人报道。 (1971)他们发现下列蛇的毒液能催化乳酸转化为丙酮酸: 眼镜蛇,舟山眼镜蛇亚种,

黑颈眼镜蛇、黑唇曼巴、金色眼镜蛇、埃及眼镜蛇、曼巴、黑曼巴。吴相体等。 (1985) 报道,这种酶也存在于眼镜王蛇、蕲蛇和青环海蛇的毒液中。由于该酶的生物学功能和应用不是很重要,目前尚无关于该酶纯化的报道。

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