抗原抗体反应在蛇毒和蛇伤研究方面的应用

(—) 蛇毒的测定

1.蛇咬伤免疫诊断使用已知种属特异性蛇毒抗体结合血细胞或天然乳胶进行反向凝集试验，或使用已知种属蛇毒结合血细胞或天然乳胶（或聚苯乙酰）与已知蛇毒种属特异性抗体进行凝集抑制测试用于测量标本中的蛇毒，可用于蛇咬伤的诊断。也可用固相夹心法（RIA）、免疫放射测定法、双抗体夹心法（ELISA）、真人技术、间接混合夹心法和酶免疫放大法等测定蛇毒，进行蛇咬伤（包括蛇毒的检测）的诊断。法医鉴定）和毒蛇咬伤致死病例。这部分可以在蛇咬伤的免疫学诊断中找到）。

2、蛇咬中毒剂量的测定上述RIA和ELISA可用于测定蛇咬伤患者血液中蛇咬毒的含量，从而判断蛇咬中毒的程度。上述方法还可用于测定蛇毒在各组织器官局部吸收、扩散、分布和排泄的动态，以及某些发病机制的研究。 1977年，Reid和Theakston用ELISA测定了尼日利亚北部和加纳蛇咬伤患者体内的蛇毒含量。他们发现，当蝰蛇毒液中毒时，咬伤后6h至34h的血清中毒液仍呈阳性。不含抗蛇毒血清

被咬后27小时，血清中的毒液增至最大，此时尿液也显示出蛇毒的存在。咬伤两天后，血清和尿液中的毒液水平几乎降为零，但非凝固状态仍然存在。这表明只有微量的毒蛇毒液才能导致人体完全除颤。在这种情况下，凝血试验比ELISA 更敏感。毒蛇毒吸收缓慢，因此在中度中毒时会有足够的时间使用抗蛇毒血清。他们通过ELISA证实毒液是从肾脏中排出的。抗蛇毒血清治疗后，凝血时间通常会恢复正常。此外，发现毒液在血疱液和尿液中的存在时间比在血清中的时间长，前者在2天后仍常检出。一名蛛网膜下腔出血的患者在被咬后34 小时内出血和凝血在应用毒蛇抗蛇毒血清后恢复正常。然而，在咬伤48 小时后，脑脊液和尿液仍对Viper variperus 的毒液呈强阳性。这一发现表明在毒蛇咬伤中毒，咬伤处局部肿胀和血泡形成实际上是一个毒素库，而进入这个库的抗蛇毒血清的量很少，毒素会从这里继续释放，从而导致延迟发作.性毒性作用，甚至致命的出血。

血液中蛇毒的定量测定还可以检查抗蛇毒血清和中草药治疗蛇咬伤的体内治疗效果。

3、蛇毒抗原结构分析双扩散免疫扩散、各种免疫电泳、ELISA和RIA可用于分析蛇毒的共同抗原和特异性抗原成分。 1981年，Coulter等人采用ELISA结合RIA检测了7种澳大利亚蛇毒和4种眼镜蛇毒之间的抗原关系。发现四种眼镜蛇毒仅与一种或几种澳大利亚蛇毒发生微弱反应，而眼镜蛇毒与大多数测试的抗蛇毒血清发生强烈交叉反应。这种分析方法对于在没有相应抗蛇毒血清的情况下寻找替代有效的抗蛇毒血清治疗具有实际意义。

4. 取代小鼠中和试验，评估市售抗蛇毒血清的治疗效果。 1979 年，Therkston 和Reid 使用ELISA 在体外测量ED5。与小鼠中的ED5 相同。评估。 38 种不同批次的测试抗蛇毒血清的ELISAED5。和小鼠中的ED5。通过比较，得到了很好的相关性，说明ELISA可以替代动物中和试验。该方法还节省了蛇毒用量，经济、快速、简便，可作为抗蛇毒血清效价的初步筛选方法。

(2)蛇毒抗体的测定

流行病学调查始于1979 年，Pugh 等人。采用ELISA结合农村详细调查方法进行确证

尼日利亚北部人口稠密的大草原地区蛇咬伤的发生率为每年每10万人48起，死亡率为

1%，主要蛇类是黑颈眼镜蛇；而在欠发达的Be-nue 流域，最南端的年蛇咬伤发生率约为497/100,000，死亡率为12.2%。对537份有蛇咬伤史的标本进行特异性抗体分析，210例（40%）检出阳性抗体，其中65%为蝰蛇毒抗体，13%为蝰蛇毒抗体，11%为响尾蛇毒抗体抗体中，8%为黑颈眼镜蛇毒抗体，3%为埃及眼镜蛇毒抗体。

追溯诊断利用ELISA检测蛇咬伤患者血清中的蛇毒抗体，可以进行蛇咬伤的追溯诊断。

单克隆抗体的测定常用ELISA测定杂交瘤细胞产生的单克隆抗体，采用免疫“印迹”技术筛选McAb。

(3) 免疫组织化学

荧光抗体法和酶免疫定位技术可用于研究蛇毒和蛇毒抗体在组织或细胞中的定位。