猪伪狂犬病的诊断与鉴别方法

根据疾病的临床症状和流行病学可对本病进行初步诊断，并需要实验室检测才能确诊。同时应注意与猪细小病毒、乙型脑炎病毒等引起的母猪繁殖障碍相鉴别。

本文介绍猪伪狂犬病的诊断和鉴别方法，供大家参考。

一、病毒分离鉴定

病毒分离是诊断伪狂犬病的可靠方法。病动物的各种病变组织，如脑、心、肝、脾、肺、肾、扁桃体等均可用于病毒分离，但以脑组织和扁桃体最为理想。

此外，鼻咽分泌物也可用于病毒分离。敏感细胞，如猪肾传代细胞（PK-L5和IBRS-2）和鸡胚成纤维细胞（CEF），可以在疾病治疗后直接接种。典型的细胞损伤可能在接种后24至72小时内出现。

病毒分离后，用标准阳性血清进行中和试验，以确诊疾病。

二、切片检查

组织切片荧光抗体检测：取病动物脑、扁桃体等切片或冰冻切片，采用直接免疫荧光法进行检查。

其优点是速度快、几个小时内就可以得到可靠的结果。对于新生仔猪，其敏感性与病毒分离相当，但对于育肥猪和成年猪，该方法不如病毒分离敏感。

三、pcr检测

猪伪狂犬病病毒PCR检测PCR可从病畜鼻咽拭子或组织病材料等分泌物中扩增猪伪狂犬病病毒基因，从而确诊病畜。

与病毒分离鉴定相比，PCR具有快速、灵敏、特异性强等优点。可同时检测大量样本，并可进行活体检测，适合临床诊断。

四、血清学检查

血清学诊断伪狂犬病的诊断可采用多种血清学方法。应用最广泛的是中和试验、酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、补体结合试验和间接免疫荧光试验。

其中血清中和试验的特异性和敏感性最好，被世界动物卫生组织（OIE）列为法定诊断方法。

酶联免疫吸附测定还具有特异性强、灵敏度高的特点。 3至4小时内即可得出检测结果，并可同时检测大量样本。广泛应用于伪狂犬病的临床诊断。

此外，近年来，乳胶凝集试验因其独特的优点也被广泛应用于临床。操作极其简单，几分钟内即可获得测试结果。

五、鉴别诊断

鉴别诊断猪伪狂犬病病毒的鉴别诊断方法是基于使用遗传标记疫苗的诊断方法。由于prv中存在多个非必需糖蛋白基因，缺乏这些基因的病毒突变体无法产生缺失基因编码的糖蛋白，但这并不影响病毒在细胞上的增殖和免疫原性。将基因缺失标记疫苗注射到动物体内后，动物不能产生针对缺失蛋白质的抗体。因此，自然感染野生病毒的血清阳性猪可以通过血清学方法与接种猪区别开来。

目前疫苗中缺失的糖蛋白基因主要是ge和gg基因，也有gc和gb基因缺失的情况。利用大肠杆菌或酵母等表达系统的表达产物，针对缺失糖蛋白建立了相应的鉴别诊断方法：ge-elisa（酶联免疫吸附测定）、gg-elisa、gc-elisa、gb-elisa和ge -酶联免疫吸附试验。 lat（乳胶凝集试验）、gg、lat等。实验证明这些方法特异性强、灵敏度高，可用于临床检测。同时，乳胶凝集也简单、快速。目前我国已推出ge-elisa、gg-elisa、ge-lat、gg-lat。