食用菌菌种脱毒技术汇总

食用菌菌种的脱毒方法主要有四种： 1.菌丝尖端脱毒法； 2、U型管排毒法； 3.断桥排毒法；上述方法各有优缺点。下面我们先来了解一下每种方法的具体操作方法，然后再为大家分析一下每种方法的优缺点。

1、菌丝尖端解毒法

使用90 毫米或110 毫米培养皿。没有该规格的培养皿时，也可用规格为25mm200mm的大试管代替，但操作不太方便。先按常规准备母种培养基，放入锥形瓶中，用棉塞密封，用羊皮纸包好；同时，清洗培养皿并用羊皮纸包好。两者同时消毒。在121C 下灭菌30 分钟。当灭菌器内压力为零时，取出灭菌后的物料，放入预先灭菌好的接种箱中。打开牛皮纸包装，一手拿着培养皿，一手拿着三角瓶，用手指控制打开培养皿上盖约1-2厘米，倒入约10-20毫升培养基液体，盖紧。将培养皿平放，冷却后成为光滑的平面，俗称平板。当板冷却到30C 以下时，插入待解毒的菌株。接种方法：取一粒米粒大小的种源插入盘边。接种后，在规定温度下培养（根据品种调节温度）。当菌丝萌发到最大2cm时，用锋利的接种工具剪去0.4mm以下的菌丝尖，插到新的平板上。这是1排毒。一般连续34次即可解毒。排毒次数越多，排毒效果越有保证。

2.无底试管排毒法

原料准备

1、无底试管：将待用试管底部用玻璃刀刮掉，做成两端开口的无底试管。

2、培养基配制：取木屑，加1%石灰、0.5%尿素和适量水配成含水55%的培养基。

3、其他：高压灭菌器、卫生棉条、比上面无底试管稍微小一点的试管（如果无底试管的直径是20mm，那么这个试管直接18mm左右）。

脚步

取上述培养基分成两小块，分别放入无底试管中。具体方法：填充材料时，先将直径较小的试管插入无底试管4厘米处，然后填充约2厘米，然后压紧；然后装入另一端，用手将培养物捏成球状，然后将试管口插入培养物球内约2cm，然后取下直径较小的另一端试管，将培养物推入从这一端到中间，距离另一端约1cm处的堆肥，最后两端用棉塞密封。

注意：高压灭菌时，试管应水平放置，不能垂直放置，其他操作照常进行。

接种时，将母种接在任意一端即可。平菇的菌丝充满培养基的一端后，爬壁菌丝会在空间中生长到培养基的另一端，待另一端充满后即可取出。接种另一个额叶菌丝体。

该方法的特点： 1、一高一低培养物（高碱度、低营养）抑制其他微生物的生长； 2、利用平菇菌丝爬壁能力强而细菌不能爬壁的特点。经过这样的处理，调出来的菌丝纯净、结实、有力。您不妨试一试。

3、断桥排毒法

任何优良品种的平菇，如果持续栽培，都会发生退化变异。山东省寿光市田柳镇严家村食用菌农户李发生根据脱毒马铃薯品种不会年年退化变异的原理，摸索出一套脱毒提纯嫩菇的好方法ostreatus菌株，有效防止物种退化和突变。他的方法是用常规方法制备PDA培养基。培养基凝固后，在无菌条件下，用接种耙将培养基斜坡前端较稀薄的培养基剪去约1厘米，接种于待接种雌性。在试管中间的培养基上，当菌丝长到断裂处时，会继续伸长，穿过断裂处，伸入前端的小块培养基中。强大的。转移时，在小块培养基的前端挑一块组织，按常规接种，这样经过四次吸尖培养，即可甩掉病毒。

李发生给这种简单的排毒方法起了个名字：“断桥排毒技术”。用该方法培育的平菇菌种发芽快，产量明显提高。在污染严重的年份，可以避免细菌污染造成的减产。他还建议，在使用该方法的同时，还应改进传统PDA培养基的配方，作为解毒的配套措施。只有这样，才能培育出优质高产的平菇品系。

4. 原始组织排毒法

该技术最大程度地消除了子实体在分离原始组织时处于生长中后期、携带病毒和病菌的可能性极高的弊端，真正实现了分离尖端的解毒目的纸巾。

具体操作如下：常规配制基材，氮气比调整为30：1。碳氮比不应低于25：1，以免菌丝体过度生长，形成菌皮，不易产生原基。把大口罐洗干净放在一边。准备几块11 厘米x 11 厘米的纯棉纱布。灌装至瓶口以下1厘米时，从瓶口铺上一层纱布，用一字螺丝刀将纱布的边缘插入瓶口下方，使其紧贴瓶口。封口灭菌、接种、培养等操作照常进行。菌丝装满瓶后，施加温差、湿度差、光照等刺激，一般7天左右即可出现原基。此时原基的形状是白色的块状物。当原基高达1厘米时，即可进行解毒分离。菌瓶用75%酒精擦洗后，移入灭菌后的接种箱内，箱内不再常规熏蒸。同时准备好接种针（或接种钩）、多片刀片（交替使用），与菌瓶一起放入接种箱内，喷洒溴洁尔胺，确保无菌操作。用75%的酒精擦洗双手，伸入接种盒内，将刀片烧灼消毒，然后握住冷却。打开无菌小瓶的密封，用双手用无菌镊子取出原基。由于材料表面覆盖了一层纱布，不会将基材取出，操作方便。用刀片将原基表层切掉约1mm，再用锋利的刀片将原基切割成每块约1mm2的大小。使用接种针将分离的原基片转移到平板或大试管中进行常规培养。

操作要点：一、用刀片裁剪时，每剪一刀都要更换刀片；第二，分离块连接时一定要放在边缘，可以连接在平板的边缘或者试管的前面，一般不要放在中间。

5.干扰素解毒法

干扰素在食用菌菌种解毒中的应用目前还只是理论上的，还需要进一步的研究。这将是食用菌的未来。