接种箱污染及其防治

本网讯在食用菌的生产和栽培中，由于各种原因造成各种菌种被污染的情况并不少见。各种杂菌（如霉菌、细菌）几乎无一例外地具有竞争力。它们与食用菌生活在同一培养基上，争夺食用菌的营养和生存空间，影响食用菌的生长；许多杂菌也通过产生一些有毒物质来抑制食用菌菌丝的生长。从某种意义上说，食用菌种子生产和栽培的中心工作就是如何防治各种菌种的污染，从而获得纯培养的菌丝体或培养体。做好生产中细菌污染的防控工作，其中一个重要的环节就是预防接种工作。笔者根据多年从事食用菌工作的经验，将接种造成的污染及预防措施分析如下，供同行参考。 1 接种箱霉菌滋生造成的污染有些人可能认为接种箱是用来接种的设备，必须经常消毒，每次使用前都要消毒。霉菌如何生长？这其实是一种误解。首先，大多数接种箱都是用木头做的，木头富含木质纤维素，是各种霉菌生存的良好养料；其次，接种箱的使用随生产有季节性，每年都会有很长一段时间闲置不用，这段时间极有可能发生霉菌污染。那么，什么情况下接种箱会出现霉菌污染呢？接种箱的污染一般发生在接种箱不用的时候，但笔者认为造成污染的直接原因往往不是在这个时期，而是在生产季节使用接种箱的时候。使用接种箱时，如果生产者操作不规范或使用不当，会导致接种箱过于潮湿。但没有及时清理干净，或者由于接种室内外温差大，箱内的热气凝结成水珠。接种箱受潮后，如不及时通风除湿，接种箱不用时很容易滋生霉菌。针对上述造成接种箱污染的原因，为防止污染，在实际工作中，一是接种箱在使用过程中尽量降低接种箱内的湿度。必须防止培养基、菌材或酒精棉球直接掉入箱内。如果它们不小心掉进盒子里，应该尽快清理干净。或瓶子灭菌后，应充分冷却后再进入接种箱进行消毒处理，以免造成接种箱内温度过高； (2)消毒剂的用量应严格按规定使用。目前常见的消毒剂如气雾消毒剂、福尔马林等，都是利用这些物质在使用时发生氧化反应产生烟雾或蒸汽，从而达到空气消毒的目的。我们知道，氧化反应往往会产生大量的热量。因此，在保证消毒效果的前提下，消毒剂的使用不宜过多； (3)提高接种速度，控制接种时间。接种速度慢，时间长，不仅工作效率低，生产周期长，而且酒精灯长时间燃烧会产生大量热量，使温度在箱子太高了。另外，过长的接种时间也会延长培养基和细菌在空气中的暴露时间，增加细菌污染的机会。二、接种箱长期不用时，应及时打开接种箱盖和套口，以利通风排湿。事实上，在生产中往往很难完全防止接种箱受潮，但问题的关键是在生产季节结束后，应及时通风除湿，接种箱应及时更换。置于通风干燥处。如果接种箱内已经出现霉菌污染，如何处理？在实际工作中，一些生产者往往对这个问题重视不够，或者根本没有意识到这个问题，在使用接种箱时仍然按照常规方法进行消毒（众所周知，如果浓度过高消毒剂和消毒时间不延长在某些情况下，消毒剂的消毒效果与空气中的细菌数量密切相关），结果往往是“不明”的大面积污染。

接种箱出现霉菌污染后，需用酒精棉球或棉球蘸福尔马林擦拭可见霉菌，再用福尔马林熏蒸或气雾消毒剂消毒，这样连续处理2次即可3次后使用。 2 接种作业造成的污染接种是食用菌生产、栽培中非常重要的一个环节，对杂菌污染的控制十分重要。接种时，要求生产者严格掌握微生物无菌操作规程。综上所述，主要有以下几点： 2.1 各种接种工具和用品应与料袋、料瓶、菌种等一起消毒，操作时应尽量避免将物品带入箱内。 2.2 进箱前用箱外清水洗手，进箱后用酒精棉球擦拭双手和接种工具，接种工具用火焰燃烧消毒，定期用火焰消毒在接种过程中。 2.3 试管种扩大培养时，试管应平放，试管口不得朝上，试管口不得离开酒精灯的火焰，以达到“密封”火焰。 2.4 接种操作应做到“轻、快、准”。 “轻”是指接种时动作幅度不宜过大，以减少空气波动； “快”是指动作要快，避免细菌和培养基长时间暴露在空气中； “准确”是指接种动作必须准确到位，接种工具、菌块等不得乱碰乱放。 2.5 接种操作完成后，及时清除物品，清理箱体。 3 接种箱内空气造成的污染接种箱内空气中细菌孢子或微生物细胞的数量直接影响接种后培养物的纯菌率。箱内空气污染的原因有很多，如消毒不彻底、接种箱密封性差等。其中，消毒不彻底是箱内空气污染最常见的原因。消毒不彻底可能是消毒剂本身造成的，例如消毒效果差、用量不够等，也可能是因为长期使用同一种消毒剂（长期使用同一种消毒剂导致消毒效果差） , 其他如果原因可以排除消毒剂本身的质量问题，从生物学的角度来看，往往是由于消毒剂的定向选择对细菌耐药性的变异，使耐药人群细菌不断增多，鉴于此，生产中应注意不同消毒剂的轮换使用）。此外，接种箱密封性能差也是造成空气消毒不彻底的原因之一。 （湖北省远安县胡四新职业教育中心学校） 编辑：黑子