羊肚菌菌种分离和培养技术

1.品系分离目前可纯人工栽培的羊肚菌品种有红羊肚菌、阶梯纹羊肚菌、尖头羊肚菌、六梅羊肚菌、七姐妹羊肚菌和粗柄羊肚菌、普通羊肚菌。目前，我国栽培品种以黑品系为主。梯羊肚菌占总栽培面积的95%以上，产量和稳定性最好；其次是六美羊肚菌和七美羊肚菌，产量稳定，可与梯羊肚菌媲美，发展潜力巨大；羊肚菌黄色株栽培规模小，产量和稳定性有待进一步提高。

通过孢子分离、组织分离或基质分离获得纯菌株。分离物必须经过纯化和鉴定，并且必须进行出菇测试才能用于大规模种植。通常，分离株在2025培养2天即可萌发，3天左右可形成初级菌落，挑取萌发菌落的尖端进行纯化或扩增。

2、母种培育

各种真菌培养基都适合山核桃菌丝体的生长。通常在25%的条件下培养4d-7d菌丝即可长到试管内，5d-8d菌核开始形成。

母培养基：PDA培养基，马铃薯200g（煮汁），葡萄糖20g，琼脂18g~20g，自来水1000mL，pH值自然； CYM完全培养基：葡萄糖20g，蛋白胨2g，酵母膏2g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁0.5g，磷酸二氢钾0.46g，琼脂粉20g，蒸馏水1000mL。

优良母种菌丝生长均匀，白色菌丝致密，初期菌丝强，气生菌丝强，爬壁能力强，后期菌丝产生淡棕黄色素，菌落呈淡棕至褐色。大多数羊肚菌菌株在培养4 至6 天后开始产生菌核。菌核初为白色，针尖大小，后期芝麻至绿豆粒大小，呈片状散在或团聚，随生长时间增长菌核开始变黄。最终颜色为棕黄色。

3.原种和栽培种培养基

原种和栽培种的培养基配方基本相同，均经常压或高压灭菌后使用。常用的配方如下：

杂木屑70%、麦麸20%、生石灰1%-2%、石膏1.5%、腐殖土10%；

杂木屑60%、小麦25%、生石灰1%-2%、石膏1.5%、腐殖土15%。

每18mm180mm雌性种子块转入6瓶原种，每瓶原种转入50-55袋栽培种。 750mL菌株瓶生产原种，22至25暗室培养，15d至20d可充分生长，25d可用于制作栽培种。品种采用14cm28cm丙烯或乙烯菌种袋，25天长成后30天左右即可使用。每公顷栽培种数4500袋，菌种约300kg3375kg。

4.“外援营养袋”配方

“援外营养袋”配方：可与栽培种相同，或40%玉米芯、25%谷壳、20%小麦、1%-2%生石灰、1.5%石膏、15%腐殖土。 “援外营养袋”采用12cmx24cm乙烯或丙烯菌种袋。每公顷用量为2700030000袋。 “外援营养袋”装袋后经过杀菌，冷却后即可使用。