菌种培育的技术要点

菌株分母种、原始种和栽培种。通常也称为一等种、二等种、三等种。栽培方法不同，技术要点如下：

1、母种培养：母种培养是指通过组织分离或孢子分离得到的菌株。母种培养基的制备通常使用马铃薯琼脂培养基。准备1000毫升培养基，用土豆200克，琼脂（琼脂）18-20克，葡萄糖20克。

做法：先将土豆洗净去皮，蚕豆切成小块，放入1000毫升水中煮30分钟，用6-8层纱布过滤，将失去的水分补足。加入琼脂溶解后，加入溶解的糖，加水至1000毫升。然后分装试管，每管含1/5-1/4，加棉塞和包纸。 1.2公斤压力杀菌30分钟，趁热放在斜坡上。冷却后置于25-27，观察无杂菌后方可接种。一个母种可以转移25-30 个试管。将无菌操作接种的试管在25左右恒温培养，半个月左右菌丝即可长满试管。培养过程中应注意清除被细菌污染的试管。培养好的母种移入冰箱4保存半年，或室温保存3个月。

2、原种培育：原种培育的原料可以是木屑（木屑）或棉籽壳。木屑培养基配方：木屑78%，麦麸或米糠20%，白糖1%，石膏1%（生石膏、熟石膏均可，但须磨成粉后使用）。棉籽壳培养基配方：用棉籽壳100斤加马铃薯浸汁3%（3斤马铃薯切成泥煮30分钟滤液），白糖0.1%，硫酸镁0.1%（按千分之一计）的水量）。

方法：在培养料中加水，混匀。培养料的湿度要用手捏紧，手指间能看到水珠，但不能滴落。斤）。然后装瓶，装瓶方法是边灌边轻轻摇晃瓶子，使瓶身上下紧实适度，灌到瓶肩压平料，洗净内外培养料瓶口，加棉塞和包纸捆好，最好放入高压灭菌器中灭菌，1.5公斤压力灭菌一小时。冷却后，在无菌条件下接种。将试管中的母种放入瓶中，一粒母种可接4-5瓶原种。接种后于25恒温放置1个月左右，菌丝满瓶即为原种。

3、栽培品种：栽培品种实际上是对原有品种的扩充。栽培种木屑培养基配方与原种相同。棉籽壳培养基的配方也与原种相同。装瓶后灭菌，在无菌条件下将原菌装入栽培瓶中。一瓶750ml原种培养后可接80-100瓶。接种后置于25恒温条件下孵育一个月左右，待瓶满后再播种。培育原种、栽培品种时，接种后2-3天检查一次，待材料表面长满菌丝后每周检查一次。挑出被杂菌污染的菌种，弃于培养室外。