大杯伞蘑菇菌种制作方法

1、母种培养基的制作以马铃薯琼脂为培养基。培养基的制作方法是：先准备200克土豆，选择新鲜、无芽、无病虫害的土豆去皮切成小块，倒入1000毫升水煮15分钟。此时将土豆捞出，用纱布过滤土豆渣，滤液中加入葡萄糖20克，琼脂20克。如果没有葡萄糖，也可以使用白糖。收好后，再将滤液煮沸。待琼脂完全溶解后，可用玻璃漏斗将滤液分装于规格为18180mm的玻璃试管中。通常滤液的高度不应超过试管的三分之一，然后及时用棉花塞住试管，使其密闭，防止其他细菌的侵蚀。然后将玻璃试管放入高压灭菌器中进行灭菌，保持温度在121，灭菌30分钟。待灭菌器压力降为零后，取出试管，在滤液冷却前稍微倾斜放置。一般倾斜度为20度。半小时后，由于琼脂凝固，试管中的培养基就会凝固，母种培养基就做好了。 2、母种接种接种应在无菌操作室或无菌室超净工作台上进行。下面详细看一下具体操作方法：接种前，无菌操作室或超净工作台预开紫外线灯10-30分钟。这样就起到了消毒杀菌的作用，工作人员还需要在紫外线下进行照射杀菌。此时，在手术台上点亮酒精灯，右手握住接种针在火焰上灼烧，直至接种针针尖变红，晾凉片刻。左手拿着两支试管，一支是原母种，一支是待接种的试管，右手拔掉试管的棉塞，然后用接种针挑一个来自母种的0.5平方厘米的小块。 轻轻放在试管斜面上。最后套上棉塞，母种接种工作就完成了，但操作中要注意一点，菌块不要碰到未灭菌的试管外壁。 3、母种培养将接种后的试管置于恒温培养箱中培养母种，温度控制在25左右。一般经过一周以上培养，即可产生菌丝，接种原种。