液体菌种培养关键步骤

液体菌株设备最好具有以下功能：断电保护装置和防止培养液倒流的装置。制作液态菌的几个重要步骤：

1.菌种生产

制作液体母种的方法也有很多种。我一般用小木屑等养料，用锥形瓶培养。这个环节比固体菌种的培养要细心。尤其要注意细菌的监测，要把握好菌种的环节。

2. 培养基灭菌

该环节必须严格按照操作规程，把握每一个步骤，确保培养基完全灭菌。期间应注意培养基不能装得太满，否则放气时液体会从放气阀中冲出。个人建议在放气阀上加装止回阀，避免断电。

三、接种环节

接种环节也是非常重要的一个环节。我们通常将母种勾出，放入另一个装满蒸馏水的大锥形瓶中，然后倒入培养缸中。大哥链接一定要防火，否则很容易被感染。

4. 培养环节，监测菌种纯度（最重要的环节）

我个人认为这个环节是液体菌种培养的中心环节，也是最重要的环节。严格按照操作规程培养菌种，注重每一个细节。

(1) 空气过滤器和连接培养缸的硅胶管应预先一起灭菌。建议在空气过滤器和连接培养槽的硅胶管之间安装一个止回阀，以防止培养基倒流，这一点非常关键，否则培养基容易因内、外变化而倒流。培养过程中的外部压力差。

(2)监测细菌的纯度。这一步是至关重要的一环，这一步将直接决定你的成败，监控不好可能会导致全军覆没。有几种方法可以监测菌株的纯度：

A。看：检查培养基是否透明澄清，菌球是否均匀。培养基不应浑浊。用试管或锥形瓶从下方取少量液体（注意必须在大火焰保护下进行），观察菌球是否悬浮，短时间内不能沉浮.

b.闻：闻放气阀处是否有纯正的菌丝香味。不能是其他酒味、酸味甚至恶臭。有必要区分霉菌和细菌感染的不同气味。

C。显微镜观察：用显微镜观察一些霉菌的特性，通常可以用鉴定出的液态菌进行观察练习，借助一些教材进行对比观察。这只能靠积累的经验来决定，但也是必不可少的。本论坛介绍了显微镜的具体使用方法。

d.培养监测：这一步最简单直观，直接反映菌株是否纯正。具体操作如下：事先准备好试管或锥形瓶琼脂培养基，并提前做好灭菌工作，然后用这个小锥形瓶或试管接少量培养液（这两个人操作在一步，一人负责火焰保护，一人负责接液），全程在火焰保护下用卫生棉条覆盖。以一定角度放置，使琼脂的一部分暴露在培养基中。控制温度，1-2天内观察。您可以将霉菌和细菌尽收眼底。如有感染，应及时将培养缸内的培养基全部倒掉，否则后果很严重。

5.疫苗接种环节

首先在保证液态菌纯净、旺盛的前提下，再讨论接种环节。接种也是液体菌种生产的关键环节，因为菌种含水量大，操作过程中容易感染空气中的杂菌。下面介绍一下接种方法，希望对您有所帮助。接种操作：5人一组，每组接种枪1支，酒精灯5盏。 1人负责抓取接种枪和注菌，另外4人负责开袋（菌袋要用无棉盖密封，便于操作）。每个人面前都有一盏酒精灯。酒精灯的火焰要大到能包围无棉盖。接种时，打开火焰上的盖子，在火焰上接种，连接完成后盖上火焰上的盖子。整个环节要迅速，否则火焰会烧坏菌袋。不使用时，将接种枪的整个尖端放在火焰上，避免将其置于空气中。整个操作环节安全性高，对接种室的灭菌要求不高。