食用菌诱变育种方法


诱变育种可以大大增加品系的变异性,使人们可以从诱变种群中筛选优良品系。常采用物理、化学等诱变剂来动摇菌株的遗传性,直接或间接作用于核酸物质,可强烈引起菌株的突变。诱变育种的诱变剂很多,常用的有紫外线、X射线、Y射线、硫酸二乙酯、5-溴尿嘧啶、氮芥、N“广甲基N”亚硝基胍等。诱变育种方法分三步:一是制备孢子悬液,将新鲜的无菌食用菌孢子转移到5毫升无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液中,摇匀,形成孢子悬液。孢子悬浮液的浓度应优选每毫升含有106-109个孢子。二是诱变处理,如用诱变剂进行紫外线处理,诱变处理要在暗箱中进行,箱内安装15瓦紫外灯,悬空30厘米,开灯诱变处理前20分钟,使波长稳定,然后将悬浮液倒入直径6cm的无菌培养皿中,打开培养皿盖,照射0.51分钟。每毫升经辐照的孢子悬浮液中的活孢子数约为105-108 个。因此,要获得单个菌落,需要用无菌水将照射过的孢子悬液稀释1000至100,000倍。然后取0.2ml释放液涂于装有琼脂培养基的培养皿中,25培养510天。此时每块平板上可获得数十个单菌落。选择纯净、稳健的单菌落转移至倾斜试管中进行进一步测定和筛选。三是挑菌筛选。诱变处理只能扩大其变异范围,不能确定变异方向。因此,诱变的最大难点在于筛选。需要突变个体。这样,变异的孢子需要及时培养长成菌,挑菌,挑出单个发育良好的菌落,移入倾斜的试管中。一个菌落只与一个倾斜面相连。原种4瓶,然后进行栽培试验,反复比较各菌落的生产性能,选出最好的。

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