液体菌种培养的技术环节


液体菌株设备最好具有以下功能:断电保护装置和防止培养液倒流的装置。下面介绍制作液态菌种的几个重要步骤: 菌种制作:制作液态母种的方法有很多种。作者一般用小木屑加其他营养液在锥形瓶中培养。这个环节比固体菌种的培养要细心。尤其要注意细菌的监测,要把握好菌种的环节。培养基的灭菌在这一环节中,必须严格按照操作规程,把握每一个步骤,确保培养基完全灭菌。期间应注意培养基不能装得太满,否则放气时液体会从放气阀中冲出。个人建议在放气阀上加装止回阀,避免断电。接种环节接种环节也是一个很重要的环节。我们通常将母种勾出,放入另一个装满蒸馏水的大锥形瓶中,然后倒入培养缸中。大哥链接一定要防火,否则很容易被感染。菌种纯度的培养与监测(最重要的环节) 笔者认为,这一环节是液体菌种培养的中心环节,也是最重要的环节。严格按照操作规程培养菌种,注重每一个细节。 1、空气过滤器和连接培养缸的硅胶管要提前一起灭菌。建议在空气过滤器和连接到培养罐的硅胶管之间安装一个止回阀,以防止培养基倒流。这个非常重要。否则,由于培养时内外压差的变化,培养基容易倒流。 2.监测细菌的纯度。这一步是至关重要的一环,这一步将直接决定你的成败,监控不好可能会导致全军覆没。菌种纯度的监测方法有以下几种: 看:看培养基是否透明澄清,菌球是否均匀。培养基不应浑浊。用试管或锥形瓶从下方取少量液体(注意必须在大火焰保护下进行),观察菌球是否悬浮,短时间内不能沉浮. 闻:闻放气阀处是否有菌丝体的纯香味。不能是其他酒味、酸味甚至恶臭。有必要区分霉菌和细菌感染的不同气味。 显微镜观察:用显微镜观察一些霉菌的特征。平时可以用鉴定出的液态菌进行观察练习,借助一些教材进行对比观察。这只能靠积累的经验来决定,但也是必不可少的。本论坛介绍了显微镜的具体使用方法。 培养监测:这一步最简单直观,直接反映菌种是否纯正。具体操作如下:事先准备好试管或锥形瓶琼脂培养基,并提前做好灭菌工作,然后用这个小锥形瓶或试管接少量培养液(这两个人操作在一步,一人负责火焰保护,一人负责接液),全程在火焰保护下用卫生棉条覆盖。以一定角度放置,使琼脂的一部分暴露在培养基中。控制温度,12天内观察。您可以将霉菌和细菌尽收眼底。如有感染,应及时将培养缸内的培养基全部倒掉,否则后果很严重。接种环节首先说一下接种环节,在保证液态菌纯净、旺盛的前提下。接种也是液体菌种生产的关键环节,因为菌种含水量大,操作过程中容易感染空气中的杂菌。我把我的接种方法公开一下,希望对你有所帮助。接种操作:5人一组,每组接种枪1支,酒精灯5盏。 1人负责抓取接种枪和注菌,另外4人负责开袋(菌袋要用无棉盖密封,便于操作)。每个人面前都有一盏酒精灯。酒精灯的火焰要大到能包围无棉盖。接种时,打开火焰上的盖子,在火焰上接种,连接完成后盖上火焰上的盖子。整个环节要迅速,否则火焰会烧坏菌袋。不使用时,将接种枪的整个尖端放在火焰上,避免将其置于空气中。整个操作环节安全性高,对接种室的灭菌要求不高。

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