食用菌种生产技术规程

食用菌是指人工栽培食用菌的纯菌丝体，通常分为母种、原种和栽培种。母种经过严格筛选，确认为具有生产价值的纯菌丝体。母种在试管斜面培养基上培养，又称试管种或一级种。将母种转移到木片或谷物培养基中得到的菌种称为原种或次种，培养容器多为罐装瓶或菌种瓶。原种再繁殖的品系称为栽培种或第三种，可直接用于生产栽培。一、母种制备方法1、制备母种斜面培养基。最常用的培养基是PDA培养基。制法是：取几个没有病害的土豆，洗净去皮，切成薄片，重200克，加水1000毫升烧开，煮至土豆酥脆不成度。溶液用6层纱布过滤，滤液加水定容至1000ml，加入琼脂20g和葡萄糖，继续加热至熔化。 18010mm的试管使用前应刷洗干净。分装后，塞上棉塞；每10个扎成一束，竖放于小铁丝笼中，高压或蒸锅灭菌，趁热置于斜坡上，待培养基凝固后用于接种。 2.组织分离合法母种。选择生长旺盛、外形整齐、花大而厚、无病虫害、具有本品种特点的子实体，在780%成熟时采摘，作为分离材料。将菇柄剪去，用75%酒精棉球擦拭菇体表面，移至接种箱中。接种箱预先用甲醛熏蒸。用酒精棉再次擦拭子实体材料，从帽上纵向撕下，用消毒过的刀片或小镊子从帽与杯的连接处夹取材料，剪出麦粒大小的组织，并将其移至试管中的斜面培养基中间，每管吸取1片。接种过程中，试管口始终在酒精灯火焰上方，接种针也应在火焰上烧红，待试管口冷却后再取接种物。每次可接种数十管，然后送入培养箱或培养室进行培养。温度保持在23-26，空气相对湿度保持在70%左右。培养3天后，组织块周围可见白色蓬松的菌丝，一周左右即可覆盖试管。若斜面培养基上出现绿色、红色、黄色、黑色、乳白色菌落，则为杂菌污染，应及时清除。严选斜面覆盖的菌种，选择生长快、菌丝白色粗壮的菌种，转管一次，即得母种。 3、母种转管培养。在接种箱内进行试管转移，预先在接种箱内放入一定量的斜面培养基，接种箱常规灭菌。操作人员洗手，穿白大褂，戴帽子，遮住头发，用75%酒精棉擦拭双手和试管壁。左手拿着母种试管和培养基试管，右手拿着接种针在酒精灯的火焰上打开试管棉塞，将接种针和试管口烧在同时点燃火焰，并保持试管口紧贴火焰。将烧焦的接种针放在管口壁上冷却，然后用针尖剪下一小块长满菌丝的培养基，大约有麦粒大小，迅速从管口中取出，将其插入介质斜坡的中间，然后将试管口放在火焰上燃烧，快速插入卫生棉条，然后取下一管。全部接种完毕后，送入培养箱或培养室。二、原种制备方法1.原种培养基的制备。配方：阔叶木片78%，麦麸20%，蔗糖、石膏粉各1%，pH值6.5，水分60%。也有玉米粒或小麦粒做原种培养基，但成本高。根据生产数量，按配方比例称取物料，混合均匀，使水分合适，即用手握住物料，至手指间有水滴但不要滴下，然后装瓶，直到它到达瓶肩。中间打圆孔，增加透气性，瓶口用聚丙烯薄膜扎好，可以及时消毒，可用高压或蒸土器。 2、接种培养。接种室、接种箱常规消毒。将灭菌后的原始种子培养基罐装瓶或菌种瓶放入接种箱中，每次可取200瓶，然后用甲醛熏蒸一次。操作人员严格执行无菌操作。

用酒精棉擦拭母种试管外壁，取接种盒，在火焰上打开棉塞，右手拿接种铲或大镊子，在火焰上烧红待凉，然后从母种管丝（附有培养基）中挑出豆粒大小的菌块，打开原种培养基瓶的薄膜，迅速将母种菌丝体放入原种培养基的中央，使菌丝体表面紧贴瓶内培养基材料表面，立即盖上保鲜膜，再取下一瓶。 1个雌性种子可连接15-20瓶原种。接种菌瓶应及时贴上标签，注明食用菌种类、等级（若干等级）、接种日期、接种器等，及时送培养室培养。温度保持在23-26，空气相对湿度保持在70%左右。在室内，遮光或微弱的散射光就足够了。培养30天左右菌丝长满瓶可用于繁殖栽培种。如暂时不用，应在干燥、低温、避光的条件下短时间存放。 3、栽培种生产方法栽培种是直接用于生产栽培的菌种，其生产方法与原种基本相同。 1瓶原种可扩充至100瓶以上栽培种。培养基与原种相同。灭菌后在接种箱内接种。在酒精灯的火焰控制下，从原种子瓶中取出一片指甲盖大小的菌丝体，放入培养基中央，盖上薄膜，然后拿起下一瓶， 瓶子全部捡完后送到培养室培养。避光培养30天待菌丝满瓶后用于培养。