食用菌诱变育种三步骤

诱变育种法分三步：一是制备孢子悬液，即将新鲜的无菌食用菌孢子转移到5毫升无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液中，摇匀，形成孢子悬液。孢子悬浮液的浓度应优选每毫升含有106-109个孢子。二是诱变处理，如用诱变剂进行紫外线处理，诱变处理要在暗箱中进行，箱内安装15瓦紫外灯，悬空30厘米，开灯诱变处理前20分钟，使波长稳定，然后将悬浮液倒入直径6cm的无菌培养皿中，打开培养皿盖，照射0.51分钟。每毫升经辐照的孢子悬浮液中的活孢子数约为105-108 个。因此，要获得单个菌落，需要用无菌水将照射过的孢子悬液稀释1000至100,000倍。然后取0.2ml释放液涂于装有琼脂培养基的培养皿中，25培养510天。此时每块平板上可获得数十个单菌落。选择纯净、稳健的单菌落转移至倾斜试管中进行进一步测定和筛选。三是挑菌筛选。诱变处理只能扩大其变异范围，不能确定变异方向。因此，诱变的最大难点在于筛选。需要突变个体。这样，变异的孢子需要及时培养长成菌，挑菌，挑出单个发育良好的菌落，移入倾斜的试管中。一个菌落只与一个倾斜面相连。原种4瓶，然后进行栽培试验，反复比较各菌落的生产性能，选出最好的。