双孢蘑菇制种技术


一、制备原理及种类(一)培养基制备原理1、培养基培养基是为食用菌及其他生物提供生长发育所需的营养物质和特定环境条件的基质。例如,蘑菇真菌是有机营养中的草腐生菌。培养基的配制不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐、生长因子,还要考虑水和pH环境,还要考虑是固体培养还是液体培养。因此,按真菌生长发育的比例配制的灭菌营养基质可称为培养基。也就是说,培养基必须满足三个条件:含有菌种生长发育所需的营养物质;具备真菌生长的环境条件;它已经过消毒并保持无菌状态。 2、培养基的选择在制备全株的过程中,从母种到原始种和栽培种,每个阶段的目的要求不同,所选培养基的比例也应不同。一般母种的初生菌丝比较嫩弱,分解养分的能力差。要求营养丰富全面,氮源和维生素的比例要高。必须选择容易被菌丝吸收利用的物质,如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐和生长素等,原种和栽培种需要量大,菌丝分解能力强能力和可利用农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等大量原料作为培养基。 (二)培养基的种类1、根据营养物质的来源,培养基可分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基。 .天然培养基天然培养基是指用化学成分不明确或不稳定的天然有机物配制的培养基,如各种农副产品及其下脚料——小麦大豆、玉米粉、麸皮、米糠、农作物秸秆、木屑等、棉籽壳、甘蔗渣等,以及动植物组织提取物——牛肉膏、肉汤、马铃薯汁、麦汁汁、豆芽汁等均可用于制备天然培养基。范围广、成本低、营养丰富,适合在生产中大面积栽培食用菌,但这些天然有机物的化学成分因产地、品种、生长期等方面的差异而无法标示。批次之间的成分也不稳定,因此不适合精细的科学实验。为了通过分离驯化食用菌培养基、半合成培养基来促进食用菌菌丝的生长发育,常在天然培养基中加入适量的无机盐,或在合成培养基中加入适量的某些天然有机物质,它成为一种半合成介质。这种培养基种类繁多,用途广泛,也是培养细菌和实际培养最常用的培养基。 .合成培养基是指由有机物质(碳水化合物、含氮化合物、有机酸)或化学成分已知的无机物质配制而成的培养基。这种媒体的成分和内容明确,价格也比较昂贵。一般用于实验室做与食用菌有关的营养、代谢、菌种鉴定等生理生化研究。 2、根据培养基的物理状态,培养基可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。 、液体培养基根据食用菌所需营养成分,按一定比例制成营养液,称为液体培养基。液体培养基可用于营养源的筛选实验,以及酶活性等生理生化方面的研究,液体培养基生产的菌株也可用于生产。 .凝固培养基将各种营养物质按比例配制成营养液后,加入适量的固化剂,如琼脂,制成凝固培养基。倾斜试管可用于保存和扩增菌种,也可制成各种平板固化培养基分离菌种。 .固体培养基以富含纤维素和木质素的各种农林废弃物,如木屑、棉籽壳、稻草、玉米雄蕊等为主要原料,再加入适量的米糠或麸皮及无机盐制成。打好坚实的培养基基。该培养基可作为生产二、三级菌种的培养基,也可用于制作发酵草粉保鲜菌种的培养基。

二、一级种培养基一级种又称母种,其培养基一般以试管为容器,故又称试管斜面培养基。种子保鲜等,以下是蘑菇菌种生产的常用配方。 1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA) 马铃薯(去皮)200g 葡萄糖20g 琼脂18-20g 水1000ml 2.马铃薯综合培养基(CPDA) 马铃薯200g 葡萄糖20g 磷酸二氢钾3g 硫酸镁1.5g 维生素B1 0.05mg 琼脂18-20g水1000ml 3. 马铃薯酵母提取物培养基(PDYA) 马铃薯200g 葡萄糖20g 酵母提取物1.5g 琼脂18-20g 水1000ml 4. 麸皮葡萄糖培养基麸皮50-70g 葡萄糖20g 琼脂18-20g 水1000ml 5. 堆肥浸泡汁葡萄糖培养基堆肥(干) 100g 葡萄糖20g 琼脂18-20g 水1000ml 6.玉米粉综合培养基玉米粉20-30g 葡萄糖20g 磷酸氢二钾1g 硫酸镁0.5g 蛋白胨1g 琼脂18-20g 水1000ml 9.E.B.Lamberr 培养基葡萄糖10g 镁硫酸盐0.5g 磷酸二氢钾1.9g 琼脂20克水1000毫升(适用于双孢蘑菇担子孢子的萌发) 3、二、三级培养基二、三级培养基通常使用天然养分,如农作物废弃物等秸秆、棉籽壳、甘蔗渣等,加入适量无机盐等制成固体培养基,常用培养基配方介绍如下。 1、发酵草培养基发酵麦秸72%、发酵牛粪粉20%、麸皮5%、白糖1%、磷酸钙1%、石膏1%,含水量62-65%,适合二次种2、牛粪

粉培养基

  发酵牛粪粉98% 碳酸钙2% 含水量62-65% 适合二级种

  3.棉籽壳培养基

  发酵棉籽壳97% 过磷酸钙1% 碳酸钙1% 石灰1% 适合二,三级菌种

  4.羊粪培养基

  干羊粪98% 碳酸钙2% 含水量62-65% 适合二级种

  5.矿石培养基

  膨胀珍珠岩1450克 麸皮1650克 石膏粉200克 碳酸钙50克 水1650克 pH6.2-6.4 适合二级种生产

  6.谷粒培养基

  麦粒(小麦,大麦,燕麦,高梁等)97% 碳酸钙2% 石膏1% 含水量50-55% pH6.5- 7.0 适合二,三级种

  7.小麦稻谷培养基

  小麦88% 稻谷10% 碳酸钙2% 适合三级种

  8.小麦牛粪粉培养基

  小麦88% 牛粪粉10% 碳酸钙2% 适合三级种

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