香菇母种的制备

凡是通过组织培养或孢子培养产生原母种（保藏种），并由原母种扩充而成的香菇品种，均为生产母种。母种的生产一般使用PDA培养基，选用18018mm试管，制成倾斜试管接种。 PDA培养基配方：土豆（去皮发芽）200g（也可用淀粉，用量为6g/1000ml）葡萄糖20g琼脂20g磷酸氢二钾2g复合维生素B 2g丹白冬5g硫酸镁0.3克加1300毫升水可配制1000毫升溶液介质。制法：土豆去皮，去芽，称重，切成0.5厘米厚的薄片，放入24厘米的铝锅中，加水1300毫升，煮沸5-8分钟，用双层纱布过滤，取滤液再次倒入锅中加入琼脂，煮沸后转小火融化琼脂，在研磨体中的维生素B加少量水研磨成浆状，倒入锅中， 同时加入葡萄糖、磷酸氢二钾、丹白东、硫酸镁，搅拌均匀后，趁热装入试管中，试管内溶液高度为试管的1/4，用塞子塞住棉塞，放入1.5个大气压的高压灭菌器中，消毒30分钟，或用蒸锅蒸75分钟。灭菌后趁热放斜面。介质斜面的长度应小于试管的3/4。如果卫生棉条是湿的，应烘烤3-5小时，否则湿的卫生棉条很容易沾染细菌。斜面培养基试管在干燥处放置3天后，如斜面无细菌形成，则表明灭菌完成，可用于接种。接种：一般在接种箱内进行。先将斜试管放入接种箱内，然后用75%酒精擦拭接种处和待接种菌的试管，放入接种箱内，同时放入酒精灯和接种针，用2~5克气雾剂点燃，熏30分钟后，即可接种。接种前先点亮酒精灯，用75%的酒精擦干双手，用酒精灯灼烧接种针，冷却后放入待接种的应变试管中，拖动应变试管和倾斜试管左手，右手用拇指和食指握住接种针，中指如握笔状，挑出菌种试管中米粒大小的菌块，放入斜试管，并用棉塞塞住。一根应变试管可连接50-60支倾斜试管。接种后，每5支斜试管装在一起，置于培养室内。在2325条件下，试管斜面生长1215天，即为生产母种。