食用菌种组织分离法的技术要点

组织分离法是指通过分离菇体组织获得纯菌丝的方法。食用菌的子实体实际上是一团菌丝体，具有很强的再生能力。因此，只要将一小块绿豆大小的蘑菇组织切下，移植到培养基中，就可以获得纯菌丝体。组织分离培养，从生物学的角度来看，是一种无性繁殖。双核菌丝中的两个细胞核没有融合，即亲本的染色体没有重组，所以组织细胞不像孢子细胞那样具有丰富的遗传性。但也是因为组织细胞是双核细胞。所以它们都可以生育和结实，不像需要经历配对过程的孢子细胞。此外，组织分离培养的方法相对简单，材料应用广泛。无论是幼菇还是成熟菇，只要是新鲜的，即使只有菌柄，也可以分离培养成株。组织分离法的操作步骤如下： 1、种穗和种菇的选择。组织分离的种穗、种菇必须选用优良菌种，选用质嫩、肥厚、无病虫害的优良子实体。根据生产需要，对选用的穗、菇种进行系统比较，择优剔除，保留肥厚、肥厚、无病害的籽菇作为分离材料。种穗、菇类受雨淋或吸水易沾染杂菌，一般不能作为分离材料。 2、种耳和菇体表面的无菌处理为获得无杂菌的培养物，需将种菇表面用无菌水清洗数次，用无菌滤纸吸干或用0.1%汞溶液浸泡氯化几分钟，然后用无菌水冲洗并擦干。只要掌握了分离的要领，完全可以不用表面杀菌就可以种出蘑菇。 3、接种块的切割将种菇撕下，在菌盖与菌柄或菌鳃交界处切一小块组织作为接种材料。菌鳃紧贴子实体外缘，易沾上泥土或感染杂菌。因此，分离时应选择菌盖边缘向内卷曲的干净种菇作为分离材料。为了减少携带混杂细菌的机会，在切取组织片时，要尽量小，因为肉眼所见的一小块组织中菌丝很多，切一小片不能既减少了污染，又获得了高纯度的菌种，易于生存。但是组织片越小，越容易被接种针烫死。因此，接种针在火焰上过火灭菌后，应先冷却后再接种。 4、将培养好的组织块移植到合适的培养基上后，应在适宜菌丝生长的温度下培养，一般温度为23-26。只有这样组织块才能快速生长，在寒冷的气候条件下更要注意保持一定的温度进行组织分离。