平菇菌种提纯法


首先是褶皱的附着和分离方法。利用成熟菇体菌盖产生的孢子进行栽培,获得纯菌种。过程如下:首先准备PDA试管的斜面培养基。培养基配备的用品为马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、水1000毫升。将试管存放在14C至18C的环境中并干燥2至3天。当试管壁上无游离水滴时,即可分离。病虫害,以七八株成熟平菇为原料,分离菌种。在黑暗中,借用手电筒的光束,你可以看到看起来像白色粉笔和灰烬的孢子。平菇孢子的成熟顺序是基部,即靠近菌柄的一端呈带状向前移动,菌盖前缘的凸起是孢子最活跃的部分。孢子喷射。这里剪一段,大约1厘米到1.5厘米宽的鱼鳃,用镊子剥下2片鱼鳃,用75%的酒精涂抹消毒,贴在斜试管上方的壁上,立即将它们竖直放在罐子或纸箱里。在瓶底或盒底放一层棉花(最好是脱脂无菌棉)固定试管,防止试管滑动。然后轻轻调整试管的方向,使呈凸凸状放射状排列的菌鳃面向试管内倾斜的培养基,使喷出的孢子自由落在培养基上。在18的温度下,一般放置12小时,倾斜的培养基上可见形状类似放射状排列的鳃的模糊孢子印迹。此时,在无菌接种室或接种箱内,用接种钩取下附着的菌鳃,用无菌脱脂棉塞塞住。关闭管口,以免成熟太晚的孢子掉落,然后在26的温度下直立培养。 3天后,孢子萌发成棉球状,10天左右,菌丝即可覆盖试管斜面。然后在无菌接种室或接种箱内,用接种针将装有菌丝的小片移入另一倾斜的试管培养基中,如此重复2次,进行无杂菌培养。经感官鉴定:分离培养菌株菌丝致密,粗壮有力,气生菌丝发达,爬壁性强,不分泌色素,菌丝生长快,耐高温,长势好照常在34温度下不发黄,在25温度下约8天,可盖住试管斜面,低温保存易形成子实体。通过出菇试验证明,该方法产量高、周期短、抗细菌污染能力强,可筛选出优良菌种作为原始纯菌种在生产中扩大再利用。二是孢子的快速分离。当蘑菇孢子大量冒出烟雾时,可用医用注射器快速分离孢子,得到纯菌种。从平菇孢子中分离出的菌种生理年龄年轻,生命力旺盛,常被用作菌种复壮的方法之一。具体方法如下:用100ml医用注射针头和长针头,用75%酒精消毒后,吸入40ml无菌水。 将注射器内的空气推出去,将针头插入蘑菇孢子弹的烟圈中,拔出针头,将针头向后拉,使烟气中的部分孢子随着吸力进入管内。针头后退,然后立即插入针头摇动针管,使吸入的孢子与无菌水混合均匀,形成孢子液。 用酒精棉球擦拭针头后,将针头穿过棉塞插入PDA培养基斜试管上,轻推试管,在斜培养基上滴3滴孢子液,轻轻摇动试管至均匀地铺在斜坡上。 将倾斜的试管水平放置于2426培养。当孢子萌发时,选择洁净、洁白、健壮、无细菌污染的菌丝体,将管子转移到无菌接种室或接种箱中两次,进行纯化培养。经出菇试验,选出优良品系作为纯种。注意:操作者应戴口罩、手套,穿白色医用隔离衣。作业前最好先给出菇室通风,根据实际情况喷洒,使喷出的孢子沉降到地面,以免危害人体健康

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