香菇母种的制作方法


凡是通过组织培养或孢子培养产生原母种(保藏种),并由原母种扩充而成的香菇品种,均为生产母种。母种的生产一般使用PDA培养基,选用18018mm试管,制成倾斜试管接种。 PDA培养基配方:土豆(去皮发芽)200g(也可用淀粉,用量6g/1000ml),葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸氢二钾2g,维生素B群2g,丹白冬5克,硫酸镁0.3克,水1300 毫升。以上配方可配制1000毫升溶液培养基。制法:土豆去皮,去芽,称重,切成0.5厘米厚的薄片,放入24厘米的铝锅中,加水1300毫升,煮沸5-8分钟,用双层纱布过滤,取滤液再次倒入锅中加入琼脂,煮沸后转小火融化琼脂,在研磨体中的维生素B加少量水研磨成浆状,倒入锅中, 同时加入葡萄糖、磷酸氢二钾、丹白东、硫酸镁,搅拌均匀后,趁热装入试管中,试管内溶液高度为试管的1/4,用塞子塞住棉塞,放入1.5个大气压的高压灭菌器中,消毒30分钟,或用蒸锅蒸75分钟。灭菌后趁热放斜面。介质斜面的长度应小于试管的3/4。如果卫生棉条是湿的,应烘烤3-5小时,否则湿的卫生棉条很容易沾染细菌。斜面培养基试管在干燥处放置3天后,如斜面无细菌形成,则表明灭菌完成,可用于接种。接种:一般在接种箱内进行。先将斜试管放入接种箱内,然后用75%酒精擦拭接种处和待接种菌的试管,放入接种箱内,同时放入酒精灯和接种针,用2~5克气雾剂点燃,熏30分钟后,即可接种。接种前先点亮酒精灯,用75%的酒精擦干双手,用酒精灯灼烧接种针,冷却后放入待接种的应变试管中,拖动应变试管和倾斜试管左手,右手用拇指和食指握住接种针,中指如握笔状,挑出菌种试管中米粒大小的菌块,放入斜试管,并用棉塞塞住。一根应变试管可连接50-60支倾斜试管。接种后,每5支斜试管装在一起,置于培养室内。在2325条件下,试管斜面生长1215天,即为生产母种。

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