食用菌菌种的退化和选优提纯

1 菌种退化在正常栽培条件下，其优良性状和典型性在生产和使用过程中逐渐丧失的现象称为退化，表现为产量下降、品种变差、均匀度下降、生活力下降、抗逆性下降等。菌株。反向瞄准弱点。细菌粥发生变化的原因有很多。 1.1 机械混合引起的品种变性：某一品种的试管或试袋中只含有所需菌种的菌丝体，不能含有其他种类的杂菌。 1.2 不注意人工选育引起的品种退化：品种在使用过程中经常会发生一些自然突变。虽然对表型影响较大的突变频率很低，但微突变却经常发生。在突变中，往往有利的突变较少，不利的突变较多。 2 防止菌种退化的措施2.1 为菌种的生长创造良好的营养条件和生存环境：适宜的菌种培养基可以使菌种生长旺盛，减少衰退。营养不足和过多不利于菌种的生长；因为菌株的生长繁殖受到物理、化学、生物学等外界条件的制约，所以适宜的条件会使菌株生长良好，减缓衰退；如果条件不合适，应变下降的速度会加快。 2.2 在菌种传代保存中，培养基的配方组成经常发生变化，不能继续使用某种培养基的固定配方，这也是防止菌种衰退的重要措施。 2.3 控制菌株传代次数：菌株传代次数越多，突变概率越高，菌株衰退的机会也越大。生产中应严格控制菌种传代次数，一般不超过5代。 map-by-map方法可以减少主要通道的数量。图1 菌种传代方法示意图3 菌种的纯化在分离、生产和贮存过程中，培养的菌种极易被杂菌污染。因此，被细菌污染的菌株必须经过纯化后才能用于生产。根据污染的类型和程度，需要采取不同的净化措施。 3.1连续转管切割提纯：如果食用菌斜面的菌丝被细菌污染，可将培养温度降至25以下进行培养，因为在此温度范围内，食用菌的菌丝体生长比细菌快。待食用菌菌丝长满菌落后，及时剪断菌丝前端，转管纯化。如果被污染的细菌是青霉菌和曲霉菌，则这类霉菌的菌丝体生长速度比食用菌慢。将远离霉菌的斜坡上的食用菌菌丝剪下，转移到管内。转移管时，菌丝体首先接种到斜坡的尖端。长入斜坡后，及时挖出原接种点和培养基，达到净化效果。如此将管子切开转移2-3次即可达到纯化的目的。 3.2 限养法：取直径7-10mm、高4-6mm的玻璃环或不锈钢环，置于酒精灯火焰上灼烧，置于斜面培养基中央同时加热，将环的一半嵌入培养基中，将感染了待纯化细菌的接种块放入环中培养。因此，细菌在环内的生长受到限制，而食用菌的菌丝可以穿过环，在环外的培养基上生长，转移到管内即可纯化。同理，也可以采用大培养皿盖住小培养皿的方法。 3.3 覆盖培养法：该法是在被菌污染的食用菌菌丝体斜面上浇一层厚约2mm的培养基，培养一段时间。当食用菌的菌丝体通过培养基蔓延到顶端时。管子已准备好切割。为了更加有把握，也可以将培养基覆盖两次，用两次浸润后长出的菌丝切管，达到提纯的效果。 3.4 基质菌丝体的纯化培养方法：对于试管棉条上长霉菌的食用菌斜面，用酒精棉球反复擦拭试管斜面，取出培养基，剪一段2cm长款，放入0.5cm。 1%氯化汞浸泡1分钟，用无菌水反复冲洗，然后用无菌滤纸吸干，将培养基从中间劈开，用无菌刀片切成米粒大小的块，移至new slope 可以通过在其上培养来实现纯化。 3.5药物处理方法：菌种纯化时，在培养基中加入5-10mg/kg的多菌灵、三菌灵或托布津，可有效防止霉菌的混合生长。

每毫升培养基中加入链霉素30-40毫克、四环素、金霉素20-30毫克或高锰酸钾50毫克，可有效防止细菌混合生长。但是，药物不能滥用。如真菌菌丝体对抗真菌剂（如多菌灵等）敏感，一般不采用此法。此外，四环素类在高温下易分解。使用时，培养基灭菌后温度必须降至45。稍后添加。 4 品系选择及常用方法品系选择是指从衰退种群中找出少数尚未衰退的个体，以达到恢复品系优良性状的目的。从广义上讲，在菌种生产性能下降之前，应及时采取预防措施，定期对菌种进行复壮，以防下降。常用的菌种复壮方法主要有以下几种： 4.1 消灭腐烂个体：菌种复壮首先要对生产中使用时间较长的菌种进行纯化分离，对菌群退化的原菌种进行被保存。分离出具有典型性状的单个细菌细胞，经生长测定后，进行扩增培养，恢复原菌株的优良性状。具体操作如下：在无菌条件下，刮去试管中的菌丝体，放入盛有100毫升无菌水的三角瓶中，充分摇晃振荡使菌体分散，吸取菌丝10毫升用注射器。将丝液注入盛有90ml无菌水的三角瓶中，摇匀，置于培养皿的平板培养基上，每平板滴23滴菌丝液，将菌丝液分散于在平板上方，在合适的温度下培养菌丝，使菌丝萌发，并选择强壮的菌丝将它们连接到倾斜的试管中。待菌丝长满斜面，试验符合原菌性状后方可用于生产。 4.2 定期重新分离菌种：用于生产的菌种一般在12年后必须重新分离，才能起到返老还童的作用。通常采用组织分离法进行年轻化，简单易行，周期短。或者，可以使用孢子分离法等。无论采用哪种方法，都应选择与原株形状和其他性状相同的子实体。新分离出的菌株必须经过检测，性能符合要求，方可用于生产。 4.3 木材中应定期栽植代用木本真菌。子实体长出后，应选择木耳或木耳进行分种，做到择优。