过氧化钙在食用菌菌种生产中的应用

在食用菌生产过程中，影响产量的关键因素之一是菌种品质，而菌种品质与菌龄密切相关。在二、三级食用菌的生产过程中，通常以麦粒、木屑、麦麸、米糠和棉籽壳为原料。套袋灭菌后，孔隙率变小，培养基密度增加，菌种生长发育所需的氧气极度缺乏，使菌丝在发育中后期停滞不前，菌丝喂得很慢。同一个菌袋中老菌和幼菌同时存在，造成菌种活力低下，易形成隐性污染，畸形菇比例增加，菇潮模糊，产量下降。为此，在生产中通常采用翻袋、倒叠、刺穿微孔等方法来解决二氧化碳浓度高、缺氧等问题。过氧化钙是一种无机化合物，无臭无味，微溶于水。在有湿气和二氧化碳的环境中能缓慢分解，吸收二氧化碳，变成碳酸钙，同时放出氧气[1]。过氧化钙已成功应用于北方鱼塘冬季增氧[2] 和水稻直播[3]。过氧化钙在食用菌菌种生产中作为增氧剂，混入菌种培养基中，可改善菌种生长环境中二氧化碳浓度高、缺氧的条件。生成的碳酸钙还可作为食用菌菌丝体生长发育的钙源。实验证明，过氧化钙能显着改善菌丝生长发育的微环境，使菌丝发育整齐、旺盛，菌龄一致；与不加过氧化钙的对照菌相比，菇潮明显，原菌分化整齐，菇形一致，商品率高。 1 材料与方法1.1 材料1.1.1 氧化剂过氧化钙过氧化钙（CaO2）俗称增氧灵，为白色微黄色粉末，浙江上虞捷化化工有限公司产品，有效成分含量约为70 %至75%，其余成分为氧化钙、氢氧化钙、碳酸钙和碳酸钠。重金属含量以铅计，小于0.04mg/kg。 1.1.2 实验菌株Pleurotus otreatus Ph06和Letinula edodes Lc135菌株引自福建农林大学菌草研究所，由黑龙江省佳木斯大学理学院生物系保藏。将保藏菌种复原后，选择发育均匀的试管菌种备用。 1.1.3 培养基1.1.3.1 母种培养基PDA培养基：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂20g，水1000mL，pH7.0。 1.1.3.2 中种麦粒5000g，碳酸钙20g，石膏20g，水55%60%，pH自然。 1.1.3.3 三级种子培养基：新鲜阔叶木屑78kg、麦麸20kg、红糖1kg、消石灰0.5kg、石膏0.5kg。料水比约为60%。 1.1.3.4栽培料配方鲜阔叶木屑78kg、麦麸20kg、红糖1kg、消石灰0.5kg、石膏0.5kg。料水比60%左右，PH值自然。 1.2 方法1.2.1 次级种子培养基的配制取新鲜小麦籽粒5kg，洗净，煮至7成熟。再次用水冲洗，冷却，沥干。将20g碳酸钙和20g石膏搅拌均匀，然后均匀分布在5个塑料托盘中，每托盘相当于1000g小麦种子培养基。其中1块板作为对照，另外4块板分别加入4.0、6.0、8.0和10.0g的过氧化钙，混匀以防止其粘附在板壁上。照常装入500mL生理盐水瓶中，密封，高压熄灭。细菌，冷却。然后接种活化菌株，置于25-27恒温培养箱中，常规管理。第3天观察菌丝生长情况，记录菌丝生长情况。 1.2.2 三级种子培养基的配制：新鲜阔叶木屑78kg、麦麸20kg、石膏0.5kg、消石灰0.5kg。搅拌均匀后，用20kg自来水溶解1kg红糖均匀喷洒，使培养基含水量在60%左右。将堆肥均匀分成5份，其中一份为对照，其余4份分别加入100、150、200、250克过氧化钙，拌匀，放入170mm350mm0.03mm高-密度聚乙烯塑料袋，高压灭菌。冷却后，分别接种发育良好的侧耳侧耳和香菇二级菌株，置于室温20-240的培养室内进行常规管理，观察记录菌丝生长情况。 1.2.3栽培试验试验在佳木斯市四峰乡食用菌基地进行。

选择添加CaO2的侧耳菇和香菇的试验菌种，以及不添加CaO2的侧耳菌和香菇菌种（对照），堆肥100常压灭菌12小时。逐株接种，日常管理，观察记录每株洪菇的发生时间和产量，并据此评价子实体的商品率和效益。 1.2.4 铅含量的测定堆肥和子实体中重金属铅含量的测定参见文献[4]。 2 结果与分析2.1 过氧化钙对侧耳次生菌株生长的影响表1试验数据表明，随着过氧化钙添加量的增加，菌丝平均生长速度加快，装瓶时间缩短。 2.2 过氧化钙对三代菌株生长的影响。另外，121高温灭菌2小时，会使袋内菌丝生长发育所需的氧气更加匮乏。添加过氧化钙的实验组菌袋中，菌丝生长旺盛，喂养快，生长速度均匀，早、中、后期无显着差异。对照组菌丝生长前期较快，中后期菌丝生长速度明显减慢，菌丝稀疏杂乱。解剖对照组菌袋，可明显闻到发酵过程中菌体固有的酸味；而添加过氧化钙的实验组菌袋酸味明显减弱，菌特有的香味浓郁纯正。与对照组相比，实验组菌丝袋充满CaO2的天数普遍缩短，菌龄相同，菌体活力较强

表1　过氧化钙对糙皮侧耳和香菇二级菌种生长的影响

表2　过氧化钙对糙皮侧耳和香菇三级菌种生长的影响

　　2.3　栽培实验

　　栽培实验结果表明，与对照相比，添加过氧化钙的栽培菌种，其产量、商品率和产品货架寿命均明显提高，生物学性状和农艺性状也明显改善。添加过氧化钙的栽培菌种，其菌丝粗壮、浓密、爬壁能力强、抗污染能力强，即使菌袋小面积破损，杂菌亦难以占优势；原基分化整齐一致，菇潮明显，菇形整齐一致；香菇菌筒转色整齐、一致，现蕾早，子实体菌柄粗短，菌伞肥厚，菌伞外沿内卷；子实体机械强度高，耐贮存，商品率高。

　　2.4　铅含量测定

　　试验结果表明，糙皮侧耳和香菇子实体中铅含量与培养料中铅含量的背景值相当，均在0.1mglkg以下，说明添加CaO2不会增加子实体中重金属铅的含量。

　　3　讨论

　　3.1　食用菌生产中，菌种质量与产量密切相关。使用过氧化钙作为增氧剂，能使菌种菌龄一致，减少超龄菌种和幼龄菌种的比例，菌种活力增强、吃料快、抗污染能力强，减少了二次污染，提高了菌种的质量。

　　3.2　添加过氧化钙，使菌种在相对密封环境中的生长条件得到改善。即使在温度较低的北方，发菌速度受影响亦较少。添加过氧化钙，缩短了菌种的生产周期，减少了菌种发菌过程中翻袋、倒袋工作，因而降低了菌袋破损率，减少了污染和隐性污染。过氧化钙最终降解产物不会在菌种中蓄积，且可为菌丝生长提供钙源。

　　3.3　因生产商及产地不同，过氧化钙有效含量亦不同，其有效成分在37%～75%之间。根据实验结果及过氧化钙的价格，在投入产出比较合理的前提下，过氧化钙的添加量以占栽培料的0.5%-0.8%较为适合。

　　3.4　过氧化钙在工业生产过程中的主要原材料为氧化钙、氢氧化钙和过氧化氢，其衍生物及代谢降解产物在食用菌栽培过程中不会对食品及环境造成污染。实验数据表明，在培养料中添加过氧化钙不会增加食用菌子实体中铅的含量。

　　3.5　联合国粮农组织和世界卫生组织(FAlO／WHO)1993年确定的标准指出，人体每周每千克体重铅的允许摄入量为0.025mg，即体重为60kg-70kg的成年人，每周铅的摄入限量为1.5～1.75mg[5]。中华人民共和国卫生部1996年批准[GB 7096．1996]规定的食(药)用菌中铅的含量标准是：干食(药)用菌中不高于2.0mg]kg，鲜食(药)用菌中不高于1.0mg/kg[5]。以上数据表明，FAO和WHO及我国的相关标准中允许的铅含量与本实验中子实体中铅的含量相差近十倍，添加Cao2不会增加子实体中铅的含量。

　　3.6　对于如何在其他食用菌菌种生产及栽培过程中使用过氧化钙，尚有待于进一步试验。