羊肚菌菌种制作技术

.在操作过程中，在羊肚菌生长的周围，可以看到白色的菌丝被泥土填满。从土壤中采摘这种菌丝体既简单又成功。

这里介绍两种简单的土分离方法：一种是直接土分离，另一种是浸出分离。土壤直接分离法：在羊肚菌长出的地方取出羊肚菌，取周围5厘米以内的土壤，去除表层，将土壤放入无菌接种箱中，然后放入试管培养基中对接种箱空间进行消毒。即接种箱内每立方米空间用10毫升甲醛和5克高锰酸钾，混合后产生气体进行消毒。半小时后才能操作。

用接种针从地脚上挑一块黄豆大小的土，迅速放在试管中的空白培养基上，每管各放一块，用棉塞塞住，待用后取出培养。接种。提取分离法：用无菌水稀释基土，澄清后，用接种针蘸取少量溶液，滴在试管内的空白培养基上，用棉塞塞住，取出培养.分离后于12-18培养观察。 3天后菌丝体在培养基上萌发，每天仔细检查每支试管的萌发情况和变化情况。

区分和了解各种杂菌是最关键的核心技术。真正的羊肚菌菌丝最初是灰白色的，生长很快，时间长了会变成棕黄色，有时还会出现菌核。母种7天盖好试管，原种和栽培种15天盖满瓶底。无论分离成功与否，都要进行栽培出菇试验，才能准确判断是否为出菇后的羊肚菌菌株。菌株分离成功后，在以后的转移过程中一定要小心，防止被杂菌感染。

必须适当控制高温灭菌和接种消毒，以保证菌种的质量和成活率。

3、转运纯化必须待介质表面残留的水分干燥后方可使用，否则会被细菌感染。接种需在接种箱内进行药物灭菌。从第一代纯雌性种子中挑一大块有菌丝体的培养基放在空白培养基上。每个雌性种子可接1015个。该品种只能一次种植，不能多接或多扩，否则会影响子实体的生长。 

4、培养接种后置于18-22避光培养。菌丝2-3天萌发，斜面培养基7天长出。如果不使用，请将其存放在0-3C  的冰箱中，最多可存放半年。原种的制作1、培养基制备

方

　　①、栎木屑50%，棉籽壳30%，麦麸 15%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。　　②、栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。　　③、稻草粉70%，麦麸25%，石膏1.5%，过磷酸钙1.5%，土2%，pH值自然。　　④、棉籽壳90%，木屑8%，土2%，pH值自然。　　⑤、玉米芯50%，木屑30%，米糠15%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。

　　2、操作过程

　　按配方将原料混合均匀，加入清水，使含水量达65%时装瓶。装瓶要求松紧一致，装至瓶肩，将表面压平，洗去瓶壁内外沾染的培养基，塞上棉塞，或用塑料薄膜封口。

　　3、灭菌

　　高压灭菌在0.68千克压力下维持1小时，常压灭菌在100℃温度下保持6～8小时。灭菌时间不能过长或压力过高，否则会破坏其中养分。

　　4、接种与培养

　　接种在接种箱内经消毒后，每支母种可接种原种5～10瓶。接种后放在18～22℃温度下避光培养，3天菌丝萌发吃料，10天菌丝布满培养基表面，15～20天菌丝长满瓶底。培养期间尽量避免强光刺激，菌龄以不超过50天为好。菌丝寿命与温度有关，超过30℃以上几小时就死亡。

　　栽培种制作

　　1、培养基配方

　　①、栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。　　②、棉籽壳75%，麦麸20%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。　　③、稻草粉75%，麦麸15%，过磷酸钙2%，土3%，pH值自然。　　④、玉米芯80%，米糠15%，石膏2%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。　　⑤、农作物藤秆粉75%，米糠10%，麦麸10%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。