液体母种采用套筒式封闭接种，菌种安全无污染，而常用的固体颗粒母种采用大开口火环接种，污染隐患明显。从全国各地菇友的咨询、重大疑难问题的现场排查中发现，部分食用菌企业或科研单位采购的液体种子生产设备成为闲置摆设的原因是主要是设备厂家提供的母种接种。在工艺过程中，存在感染杂菌的严重隐患。笔者就液体种子生产设备中固体颗粒母种受污染问题进行简要分析，供广大食用菌生产企业参考。 1 母种连接潜在污染危害分析最常见的是固体颗粒母种（小米等），在接种箱内搅拌均匀后加入液槽。此工序有几个杂菌、病菌污染的隐患：接种箱，在培养细菌的过程中吸入未经消毒的杂气和灰尘的细菌有机会被引入母种。 接种箱内粉碎过程中工具的消毒，搅拌过程中手臂的运动，未灭菌空气进入接种套、袖口、箱门缝隙等通风部位，可能将搅拌过程中的雌性种子引入瓶中。 接种过程中，虽然需要打开的液槽接种口被“火圈”封住，但受热空气上升气流的重力作用，使低温气流和周围的冷空气流动火焰紧紧附着在火环的外层并向上移动。开启的液槽与接种环境（室内）的温差引起自然空气对流，只能从火环外的低温空气层进行交换和补充，流入液槽。罐盖打开的瞬间，流动着温差，罐口周围未灭菌的灰尘流入罐内。 在将母种加入缸体的过程中，在打开、拔掉母种和将母种倒入缸体的过程中，由于母种瓶口壁与母种瓶口壁缝隙存在细菌而造成的负面影响。母种流出后的软木塞和瓶内空间。压力，从瓶口吸入的只能是火圈底缝或火圈外围的低温气流，而不是火焰的热气流。当已经分散成颗粒的母种流入液槽时，就是由于上述因素造成的。空气和灰尘与各种细菌和病菌混合在一起。 2 固体颗粒母种“无菌”接种措施2.1 制作“无菌”专用接种盖盒盖体由透明材料（玻璃或塑料）制成方形或圆柱形，底部留袋接种盖盒接口。袋式接口的尺寸适合覆盖液体发酵罐的接种口。接种盖盒上部装有接种套（用塑料袋热封或胶封），不留盖和门。将接种工具、开盖工具、母种直接放在液槽的接种口盖上，然后用盖盒下方的口袋盖住接种盖。 2.2亲种封口“灭菌”处理，先用95%酒精（或0.2%克霉嗪溶液）浸泡瓶（袋）塞，并浸泡瓶（袋）表面，然后将其放在接种口液罐备用。盖盒内最好设计一个平台，可先放在盖盒内的平台上。 2.3 消毒和接种消毒液、开盖工具、接种用品、95%酒精棉等。准备好，接种人员将双手插入套筒，进入接种状态后，再次点燃消毒液，等待20-30分钟，然后开始取下液槽口，等待期间，使用酒精擦洗手、器具、槽口缝隙，打开母种瓶，将母种颗粒搅匀将拆下的盖子放在一边，加入颗粒种子，盖上液槽接种口，完成无菌接种。 3“杀菌”效果概述在“杀菌”接种过程中，用95%酒精浸泡消毒，彻底杀灭瓶口和槽口水分20%以上的杂菌和病菌，使用一个用于消毒和接种的密闭箱盖，创造一个完全由人工控制的“无菌”空间，使菌体搅拌、打开罐口、加入母种的全过程不受细菌干扰，完成密闭过程无菌地将母种连接到液体罐中。
因厂家液体菌种发酵设备不同，发酵过程也不同。要实现全过程100%无污染的液体菌种生产，不仅取决于设备系统设计的“无菌”效果，更重要的是，取决于实际生产的管理和操作流程，没有机会杂菌和病菌渗入液体菌株。例如，各系统喷头的密封对接，喷头和管路中残留的液体和空气，液体菌种从灭菌、接种、发酵、使用全过程的“无菌”隔离处理等。特别是液体发酵和应用过程中的供氧和罐内呼吸空气的“无菌”处理完成，全部按“无菌”工艺程序操作和生产，不会有杂菌及病菌污染问题。笔者为辽宁省盘锦市鼎泰农业发展有限公司安装的液罐生产线，自2007年7月投产两年以来，未被细菌污染。 （作者：姚志武来源：国家科技信息服务网-北京节点）
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