菌种培养基的配制原则


根据食用菌对营养、水分和pH值的要求配制的培养料即为培养基。是食用菌生长发育的营养物质,又称基质。

一、培养基制备原则

(一)培养基原料的选择在菌种制备过程中,从母种、原种到栽培种,每个阶段的目的要求不同,所选培养基的比例也不同.应该是不同的。母种的初级菌丝一般柔弱,分解养分的能力差。要求营养丰富、全面。氮源和维生素的比例要高。必须选择容易被菌丝吸收的物质,如葡萄糖、蔗糖、土豆、玉米粉等。麦汁汁、酵母汁、蛋白胨、无机盐和植物生长素等为原料。原种和栽培种需要数量多,菌丝分解养分的能力强。可用农作物秸秆、粪草、木屑、麸皮、米糠等原料作培养基。

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 (2)养分比例培养基中碳氮比例很重要。培养基中碳源供应不足,容易造成菌种过早老化和自溶;氮源过多或过少都会导致菌丝生长旺盛或生长缓慢,不利于菌种的培养。培养基中的pH值也是影响菌丝体生长的重要因素。一般高压灭菌后培养基的PH值会下降,检查后必须调整。调节pH值时,可用石灰澄清液,也可用氢氧化钠或盐酸。配制培养基时,为避免沉淀物的形成造成营养物质的流失,应掌握各种营养物质的加入顺序。一般先加入缓冲化合物,溶解后加入主要元素,再加入微量元素,最后加入维生素等。最好在前一种养分溶解后再加入第二种养分。此外,在培养基中加入糖类时,应采用适当的灭菌方法,因为葡萄糖在高压下容易被破坏,多糖和双糖也容易因高温而水解变质。二、介质的种类介质的种类很多,分类方法主要是根据其组成、物理状态和用途。

 (一)按营养来源分类1、天然培养基采用营养丰富的天然有机质配制而成。如木屑、秸秆、麦粒、米糠、甘蔗渣、棉籽壳和动植物提取物(马铃薯煎剂、麦汁、牛肉提取物)等都是制备天然培养基的原料。这些有机物质来源广泛、价格低廉、使用方便,但其化学成分并不恒定,即人们在使用时不能完全掌握其化学成分。此类培养基只能用于生产,不适用于精密的科学实验。 

2.合成培养基用已知化学成分的各种营养素定量配制而成。适用于专门的营养生理研究。生产中使用较少。

 3、半合成培养基是指在天然培养基中加入一些已知成分的营养物质。它在生产中被广泛使用。 

(二)按培养基物理性质分类

1、液体培养基是含有食用菌生长发育所需营养物质,按一定比例配制的营养液。菌丝在该培养基中生长迅速,短时间内可产生大量菌丝。这些菌丝体可作为多种菌种使用,大大缩短了生长周期。但液体培养基深层发酵工艺要求严格,成本投入大。另一方面,生产菌种的年龄难以控制,容易老化。 2

、固体培养基常见的固体培养基有两种:一种是在液体培养基中加入促凝剂(如琼脂)制成常见的试管斜面或培养皿板。该培养基主要用于菌株的分离、纯化或延长保存。另一种是利用天然纤维或固体物质,如木屑、稻草、棉壳、废棉花、土壤、动物粪便等,加入适量的补充养分和水配制培养基,应用广泛在生产中。 

3.半固体培养基这种培养基配制后呈软膏状,国外有使用,国内生产较少。 (3)按用途分类培养基按用途可分为母种培养基、原种培养基和栽培培养基三种。 

(四)按表面形状分类1、倾斜培养基:将灭菌后的琼脂培养液注入试管中,置于倾斜面上使其凝固。用于应变膨胀管转移和应变保存。

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