家庭春兰组织培养快速繁殖


20世纪70年代以来,科研院所利用生物工程技术对兰科植物进行繁殖,效果是传统方法无法比拟的。笔者尝试在家庭环境下开展这项工作,并获得了小批量的春兰试管苗。现将具体方法介绍如下,供兰友参考。 建立家庭小型组织培养室,设备自制,方法简单。众所周知,这项工作是在无菌条件下进行的。为此,需要研制密封良好的玻璃接种箱、空气净化装置,并采取多种技术措施降低旋转瓶的污染率。采用酒精喷雾降尘,成功率提高到92%,为筛选最佳培养基配方赢得了时间,奠定了良好的基础。 家庭环境如何实现无菌操作?笔者重点从以下几个方面进行:所有与介质接触、能耐高温的容器均采用干热(140-150)处理,对不耐高温的器具采用化学方法进行灭菌消毒。温度。为了解决接种需要在火焰上进行的问题(因为箱内几乎没有空气),增加了30瓦的电炉,但因为高温容易烧坏外植体,增加了通风和冷却设施。为了减少第二次循环中刀具的污染,将高温中毒后的刀具放入一端封闭的圆筒中,同时不断吹入净化空气进行冷却。确保外植体安全进入营养瓶。所有进入箱内的物品必须用酒精消毒后方可放入,带有细菌的不得进入箱内。箱体的消毒程序是酒精喷洒后紫外线消毒,定期用甲醛、高锰酸钾熏蒸…… 选择合适的介质。诱导分化和根形成均用MS碱加萘乙酸和细胞分裂素进行。但不同的生长阶段需要调整成分,尤其是生根时,因为兰花生根比其他品种的花卉更困难,所以用高浓度NAA浸泡几秒钟的做法有很好的效果。 外泌体的收集和消毒。根长(无展开叶)的幼苗是采收时接种的最佳外植体,成活率较高(最佳接种季节为10月至次年2月)。对于外植体消毒,笔者采用0.1升汞加0.l%浓盐酸多次消毒的方法,效果比较好。 培育环境。光照1000-2000勒克斯,10-16小时,培养湿度262,空气湿度应控制在较低水平(70%-80%),否则很容易再次被污染。一些经验:家庭建立小型组织培养是可行的,而且投资小(可以充分利用家里的条件)。笔者从准备到测试只花了几百元,而且测试设备还可以用于其他物种(如木本植物、药用植物等)的研究。 思想上必须注意无菌操作,操作时必须小心谨慎。否则,兵将损失惨重。 目前由于手头没有实体显微镜,只能做发芽的实验。采取分段切样、加液、旋转床等措施,是获得大量原球茎的一种途径,其繁殖速度也将取得突破。

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