愈伤组织和试管苗的培养

一般来说，从外植体接种到愈伤组织出现需要2周时间。 2周内，即可看到外植体上逐渐生长出乳白色或黄白色瘤状愈伤组织。第一次培养愈伤组织时，培养箱的门应关闭，无需光照，因为愈伤组织在无光的情况下生长得更快。 2周后，由于培养基中的营养物质几乎耗尽，必须更换培养基并继代培养。

愈伤组织的继代培养继代培养所用的培养基与愈伤组织培养所用的培养基相同。在严格的无菌条件下（在接种箱中），将愈伤组织与原始外植体一起转移到新的培养基中。愈伤组织继代培养20天。如果培养时间延长，培养基中的营养成分会减少，外植体也会分泌一些有毒物质，引起自中毒。 20天后，可根据愈伤组织的大小决定是否继续传代培养或体外培养。若愈伤组织长至直径115厘米，即可进行体外培养。否则，将需要第二个亚文化。

在愈伤组织继代培养过程中，可以打开培养箱的门，使愈伤组织暴露在光线下。愈伤组织暴露在光线下后，其颜色会变成绿色。

试管苗培养当愈伤组织长到一定大小时，即可更换培养基，进行试管苗培养。试管苗的培养分为芽培养和根培养。为了培养出完整的试管苗，必须先进行芽接培养，然后进行生根培养。如果顺序颠倒，先诱导根，则难以诱导芽。约46周即可发芽，培根时，1周后即可见到幼根。注意试管苗应在光照下培养。

以下是继代培养和试管苗培养的培养基配方列表。 继代培养和出芽培养的培养基配方为：MS培养基+6BA（质量浓度0.5-1.0mg/1）+Naa（质量浓度0.1-0.15mg/1）。即在11ms培养基中加入510ml的6ba和11.5ml的naa原液。 Naa与6ba合用可促进不定芽生长。 生根培养的培养基配方为：MS培养基十naa（质量浓度0.10.5mg/1）。即在11ms培养基中加入15ml的naa原液。 naa起到促进生根的作用。