中兽药药材及粉散制剂的显微鉴别方法


中兽药材是指中药材和饮片。中兽药粉是指将中药原料或饮片粉碎、研磨而成的中药处方粉和中药处方超微粉。中兽药显微鉴别是指利用显微镜对中药材、粉剂、粉剂制剂的组织、细胞或内容物特征进行鉴别的方法。由于是利用显微镜来观察、鉴别药材,故此方法称为“显微鉴别法”。显微鉴别是目前《中华人民共和国兽药典》中鉴别中兽药材和中成药的主要方法。通过观察药材及处方制剂中各药材的特定组织结构,可以检测处方制剂中所列成分。它还可以检测制剂中未包含的成分,例如添加其他中药或添加处方中成分以外的化学物质。是定性判定中兽药真伪的主要鉴别方法之一。

药材经过初加工后,原有的外观特征会发生变化,特别是粉剂和片剂。药材经粉碎、磨碎后,用肉眼很难辨认和鉴别。因此,在进行显微鉴别时,必须与受试药物一起处理,制成适合镜检的切片进行观察。根据待测药材的不同,制备方法也不同。最常用的是原药材的切片显微鉴别和粉末制剂的粉末显微鉴别。

1、药材显微鉴别

切切药材的显微鉴别方法是将药材的某一部分切成各种切片,通过观察切片药材的组织结构来鉴别药材。该方法主要适用于全药材的鉴定。

1.1 药材预处理

首先将药材清洗干净,除去药材表面的泥沙和灰尘,然后选择药材中要观察的部位,将要观察的部位切割或打碎成合适大小的块或片。最好长3厘米,宽1厘米。切割的碎片或片段应该是平坦的。切制或切段时,应根据药材的质地进行切片。软硬适中的药材可直接切成片;质地坚硬的药材应软化后切成片;质地太软的药材可用乙醇浸泡。浸泡在介质中,切片直至变硬。叶类药材可用通草或葵花的茎髓作夹子切片。

1.2 生产方法

药材切片的方法主要有手工切片和机器切片两种,即徒手切片和滑动切片机切片。徒手切片是检查工作中最常用的切片方法。该方法操作简单、速度快。切片可以保持其细胞内容物的固有形状,并有利于各种化学反应的显微镜观察。徒手切片时,可以直接用手握住药材进行切片,也可以使用相应的支架固定药材,使用手持刀片或切片机进行切片。使用滑动切片机切片时,请调整切片机,直至可以切出所需的切片。切片时,为防止切片粘在刀片上,可在药材切面与刀片之间加入水和乙醇,保持湿润。使用蘸有水的刷子轻轻地将刀片上的切割部分推入装有水或50% 乙醇的培养皿中。

1.3 贴膜与观察

选择准备好的部分并将其放在载玻片上。根据不同的观察对象,加入适当的测试溶液12滴,盖上破盖,在显微镜下观察。必要时滴加水合氯醛试液进行透化,然后盖上盖玻片进行显微镜检查。进行透化处理时,将切片置于载玻片上,加入12滴水合氯醛试液,在酒精灯上加热,待边缘起泡后停止加热,然后加入适量水合氯醛试液继续加热直至透化完成。透化后,放冷,加甘油乙醇试液1-2滴,加盖片,贴标签。在显微镜下观察准备好的切片。

2.粉末显微鉴别方法

粉末显微鉴别方法主要用于粉末药材和中成药粉末或中药超微粉的显微鉴别。药材必须研成粉末,以供镜检。中药粉末可直接取样压片进行镜检。

2.1 药粉的制备

用粉片观察药材时,必须将待测药材干燥后磨碎或锉成粉末。配制粉末时,要注意取样的代表性和各部分的全面性。比如根头、根中段、根尾轻部分都要剪掉,全部磨成粉末,残头不能丢弃。并需过4号筛并混合均匀。干燥时一般温度不宜超过60,以免暴露在高温下,使淀粉糊化,难以观察其完整性。

2.2 拍摄与观察

压片前,待测粉末药物应充分混合,以保证取样具有代表性。用微量取样勺沾取少量待测粉末,置于载玻片中心右侧,滴加甘油醋酸进行测试,加入12滴液体,水合氯醛供试品溶液或其他合适的供试品溶液,用细玻璃棒充分搅拌,使供试品溶液与粉末完全混合。用左手的食指和拇指握住盖玻片的边缘,使左侧与液体层的左侧接触。然后用右手的小镊子或解剖针握住盖玻片的右侧并轻轻地将其放下。展开以填充盖玻片下方。若水合氯醛试液太少而无法填满盖玻片时,为防止产生气泡,可将试液从边缘间隙滴加。如果试液较多,可以用吸水纸吸去多余的试液。必要时可滴加水合氯醛试液进行透化,然后盖上盖玻片进行镜检。透化方法与药材片剂透化方法相同。透化后,放冷,加甘油乙醇试液1-2滴,加盖片,贴标签。在显微镜下观察准备好的切片。

3、鉴定结果的判定

对药物进行显微鉴别和含量测定时,必须按照《中华人民共和国兽药典》中有关各类药材和中成药显微鉴别的规定进行。将观察到的组织结构与兽医药典规定的要求进行比较。符合要求的,判定为符合规定,否则判定为不符合规定。为提高显微鉴别的准确性,可对照受试药品的中药对照品或已鉴别的中药材,或参考《中药显微鉴别及薄层色谱色谱图谱》。中华人民共和国兽药典》收录图片比较。

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